细胞骨架的观察课件.pptVIP

植物细胞骨架的光学显微镜观察 实验目的：掌握植物细胞骨架处理及染色方法。 实验原理：用适当浓度的TritonX-100处理时，可将细胞内蛋白质破坏，但细胞骨架系统的蛋白质却被保存，后者用考马斯亮蓝R250染色，可在光学显微镜下观察到细胞骨架的网状结构。 实验试剂： 1、M-缓冲液； 2、pH6.8磷酸缓冲液； 3、1% TritonX-100，用M-缓冲液配制； 4、0.2%考马斯亮兰R250； 5、3%戊二醛，用pH6.8磷酸缓冲液配制； 实验步骤： 撕取洋葱鳞茎内表皮细胞约1cm2大小若干片，置于培养皿中，加入pH6.8磷酸缓冲液,没过表皮即可，放置约1-2min； 吸去pH6.8磷酸缓冲液，用1% TritonX-100处理30min； 吸去1% TritonX-100，用M-缓冲液洗3次，每次3min； 3%戊二醛固定30min； pH6.8磷酸缓冲液洗3次，每次3min； 0.2%考马斯亮蓝R250染色10min； 用蒸馏水洗1-2次，将内表皮细胞平铺于载玻片上，加盖玻片，于显微镜下观察。 实验结果 动物细胞微丝束 * * *