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移液器的原理及使用 讲述人:吴 昊 移液器的结构 移液器的分类 移液器的使用方法 移液器使用的注意事项 移液器的维护和保养 移液器的结构 移液器的分类 移液器按工作原理可分为: 气体活塞式移液器 外置活塞式移液器 气体活塞式移液器 1 原理: 活塞通过弹簧的伸缩运动来实现吸 液和放液。 2 加样体积范围: 1μL~10mL 3 缺点: 不适宜移取高粘稠度液体、挥发性较大的液体 易发生交叉污染 错误的使用习惯易造成移液器精度不准甚至移液器内部腐蚀等等 外置活塞式移液器 这种移液器是采用外置式活塞,活塞设计在吸头内部,直接与液体接触,活塞与液体之间没有空气段 适用于粘度比较大或者产生气泡的液体的操作。 无空气间隔,避免了样品于空气接触可能发生的气雾交叉污染,因此也非常适合是珍贵的试剂、生物样品的移取。 三、移液器的使用方法 一个完整的移液循环: 枪头安装 容量设定 预洗吸头 吸液 放液 卸去吸头 1、枪头安装 正确的安装方法叫旋转安装法 把移液器顶端插入枪头(无论是散装枪头还是盒装枪头都一样),在轻轻用力下压的同时,左右微微转动,上紧即可。 切记用力不能过猛,更不能采取剁枪头的方法来进行安装,因为这样会导致移液枪的内部配件(如弹簧)因敲击产生的瞬时撞击力而变得松散,甚至会导致刻度调节旋钮卡住,严重情况下会将白套筒折断。 多道移液器装配枪头时,将移液器的第一道对准第一个吸头,倾斜插入,前后稍许摇动上紧,吸头插入后略超过O型环即可。 2、移液体积设定 正确的体积设定分为两个步骤: 粗调:通过旋转按钮将体积值迅速调整至接近自己的预想值; 细调:当体积值接近自己的预想值之后,应将移液器横置,水平放至自己的眼前,通过调节轮慢慢地将容量值调至预想值,从而避免视觉误差所造成的影响; 从大体积调节至小体积时,为正常调节法,调节到刚好就行; 从小体积调节至大体积时,就需要先调节超过设定体积的刻度,再回调至设定体积,可保证最佳的精确度。(这是由于计数器里面有一定的空隙,需要弥补)。 3、预洗枪头 在我们安装了新的枪头或增加了容量值以后,应该把需要转移的液体吸取、排放两到三次,这样做是为了让枪头内壁形成一道同质液膜,确保移液工作的精度和准度,使整个移液过程具有极高的重现性。 在吸取有机溶剂或高挥发液体时,挥发性气体会在白套筒室内形成负压,从而产生漏液的情况,这时需要我们预洗四到六次,让白套筒室内的气体达到饱和,负压就会自动消失。 粘稠液体可以通过枪头预润湿的方式来达到精确移液,先吸入样液,打出,枪头内壁会吸附一层液体,使表面吸附达到饱和,然后再吸入样液,最后打出液体的体积会很精确。 4、吸液 先将移液器排放按钮按至第一停点,再将枪头垂直浸入液面,浸入的深度为: P2、P10 ≦ 1 mm; P20、P100、P200 ≦ 2 mm; P1000 ≦ 3 mm; P5mL、P10mL ≦ 4 mm; 浸入过深的话,液压会对吸液的精确度产生一定的影响,当然,具体的浸入深度还应根据盛放液体的容器大小灵活掌握。 5、放液 放液时,枪头紧贴容器壁,先将排放按钮按至第一停点,略停顿后,再按至第二停点,这样做可以保证枪头内无残留液体。如果这样操作后还有残留液体存在的话,就应该更换枪头了。 正向吸液: 操作时吸液可将按钮按到第一档吸液,释放按钮。放液时先按下第一档,打出大部分液体,再按下第二档,将余液排出。 反向吸液: 吸液时将按钮直接按到第二档再释放,这样会多吸入一些液体,打出液体时只要按到第一档即可。多吸入的液体可以补偿枪头内部的表面吸附,反向吸液一般与预润湿吸液方式结合使用,适用于粘稠液体和易挥发液体。 6、卸掉枪头: 卸掉的枪头一定不能和新吸头混放,以免产生交叉污染。 移液器用完后调回最大量程。 错误的操作方式:
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