肿瘤标志物检测原理及常见问题分析.PPTVIP

二、结果不一致原因分析 （2）.类风湿因子（Rheumatoid Factor,RF）干扰 二、结果不一致原因分析 （3）HAAAs（HAMA）干扰 (human anti-animal antibodies,HAAAs) 二、结果不一致原因分析 （4）.异嗜性抗体干扰模式图 二、结果不一致原因分析 （5）.补体干扰 免疫检测系统中捕获抗体在向固相包被中和标记抗体的标记过程中,抗体分子发生变构,其Fc 段的补体C1q 分子结合位点被暴露出来,使C1q 可以将二者连接起来,从而造成假阳性。一些公司为了增加检测的敏感性,使用链霉亲和素包被固相,将捕获抗体用亲和素标记,此过程也可引起捕获抗体的构象发生改变,造成假阳性或假阴性升高。 二、结果不一致原因分析 （6）.抗体标准化问题-CA125 二、结果不一致原因分析 （6）.抗体标准化问题-CEA 厂商 CEA Gold1 CEA Gold 2 CEA Gold 3 CEA Gold 4 CEA Gold 5 Roche ? Y ? ? Y CanAg ? ? ? Y Y 上海透景 ？ ？ Y ? ? Abbott ？ ？ ？ ？ ？ 罗氏CEA说明书 二、结果不一致原因分析 （6）.抗体标准化问题-CA19-9 Sonia L. La’ulu, and William L. Roberts Performance Characteristics of Five Automated CA 19-9 Assays[J], Am J Clin Pathol 2007;127:436-440. 二、结果不一致原因分析 （7）.钩状（Hook）效应 二、结果不一致原因分析 （7）.钩状（Hook）效应 二、结果不一致原因分析 （8）.钩状（Hook）效应 二、结果不一致原因分析 （9）.外源性污染导致的部分肿瘤标志物假阳性 唾液导致CA199、CEA假性升高。 人体唾液中含CA199、CEA等抗原，因避免唾液对检测过程的污染。 人体表皮皮屑、唾液、汗液导致SCCA指标假性升高。 人体表皮细胞中含大量SCCA抗原，皮屑汗液等如果在实验过程中掉入到反应体系中将对SCCA产生假阳性。 细菌污染导致假阳性 另外细菌污染导致血清产生大量悬浮物与沉淀，在反应中导致非特异性吸附的发生，易导致假阳性。 携带污染和交叉污染 此类污染易出现在ELISA方法学及采用相同样品针的仪器上。 二、结果不一致原因分析 （10）室间质评样本差异 二、结果不一致原因分析 （10）室间质评样本差异 三、常见问题答疑 Q1 有关肿瘤标志物Hook效应问题 无HOOK效应 弱HOOK效应 强HOOK效应 HOOK效应即钩状效应, 由于抗原抗体比例不合适而导致假阴性的现象 解答：AFP在临床上有非常高的样本出现，因此我们有设置HOOK微球指示，其它项目因为我们试剂本身检测范围较广，出现HOOK的概率非常低，所以没有设置HOOK指示微球。 三、常见问题答疑 Q2 有关肿瘤标志物HAMA效应问题 解答：HAMA效应是众多特异性干扰中的一种。正常人群中，约有20%的人会有或高或低的HAMA反应，因此，每家厂家的试剂都会有相应消除HAMA的成分，对于我们来说，A液主要用途就是消除HAMA等类似干扰。但和所有厂家一样，都不能保证100%的消除HAMA反应，偶尔会有个别样本出现假阳性，此类样本，需要通过稀释等手段确认。 三、常见问题答疑 Q3 有关肿瘤标志物试剂盒装量的问题 解答：公司试剂盒装量一般按照110人份的量进行装量，多出来的试剂一个是为了防止枪头、粘壁等的损失，一个是弥补需要做标准品的缺点。 三、常见问题答疑 Q4 有关肿瘤标志物定标频率的问题 解答：因为手工操作误差、反应温度、移液器系统误差及其它系统误差，每次试验间会有区别，造成整体信号值的变化，因此不做标准曲线会导致结果存在系统偏差。公司要求必须每次试验做标准曲线。 肿瘤标志物定量检测试剂原理及常见问题 上海透景生命科技有限公司 质量管理部 杨恩环 2015-02-03 本次讲解内容 肿瘤标志物概述及试剂检测原理 结果不一致原因分析 常见问题答疑 背景 图 2009年中国部分市前十位疾病死亡专率及死亡原因构成，数据引自“中国卫生统计年鉴?2011” 背景 目前对肿瘤最有效的措施： 早发现，早治疗 图像诊断 CT 核磁共振 化学诊断 免疫学指标 血清学 癌反应 细胞及组织 一.肿瘤标志物概述及试剂检测原理 1.肿瘤标志物定义： 肿瘤标志物（tumor marker，TM）是指恶性肿瘤发生和发展过程中，由肿瘤细胞合成分泌或是由机体对肿瘤细胞反应而产生和（或）升高的，可预示肿瘤存在的一类物质。存在于血液、体液、