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第二代DNA测序技术;第二代DNA测序技术简介; 454技术;焦磷酸测序法原理及步骤;454测序流程;(3)富集固定:将含有DNA片段的磁珠富集起来,并将这些磁珠置于一种PTP平板中的特制小孔中,每个孔只能容纳一个磁珠。
(4)测序:采用焦磷酸测序法,每个含有磁珠的小孔都可以测出其中一个片段的序列。
; Illumina测序; Illumina测序流程;(3)测序:加入测序试剂,在合成连结合一个碱基后,洗脱掉游离的dNTP,然后在检测荧光信号后加入化学试剂淬灭荧光信号并去除dNTP 3’-OH保护基团,以此为一个循环,重复这个循环即可测出该片段序列。
; Solid技术;连接法测序原理;连接法测序步骤;第二轮测序
(1)第一次连接引物n-1比第一轮错开一位,所以此次得到0,1位碱基对的颜色信息
(2)化学处理后,第二次连接反应得到的是5,6位碱基对的颜色信息,第三次是10,11位碱基对的颜色信息……
?这样经过5轮测序后,可得到由颜色编???组成的SOLiD原始序列,只要知道所测DNA序列中任何一个位置的碱基类型,就可以将SOLiD原始颜色序列“解码”成碱基序列
;Solid技术测序流程;三种平台的技术差异;谢谢倾听!
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