第九章-凝集试验.pptVIP

第九章 agglutination 细菌、红细胞等颗粒性抗原，或可溶性抗原（或抗体）致敏的颗粒性载体与相应抗体（或抗原）结合，在适当电解质存在的条件下，出现肉眼可见的凝集现象。 凝集反应的定义？ 抗原 = 凝集原（agglutingen） 抗体 = 凝集素（agglutinin） 直接凝集反应 间接凝集反应 玻片凝集试验 试管凝集试验 凝集反应 分类 正向间接凝集反应（ Ag ） 反向间接凝集反应(Ab) 间接凝集抑制反应(Ag和Ab) 协同凝集反应(IgG-SPA) 间接血凝试验(RBC) 抗球蛋白试验 冷凝集反应 明胶凝集试验（粉红色明胶颗粒） 自身红细胞凝集试验 致敏载体的Ag 或Ab 载体 特殊的凝集反应 凝集反应的特点？ 1、阶段性 抗原抗体的特异性结合 出现可见的凝集反应（适量的电解质） 2、一般参与反应的抗体为多价的IgM型。 4、方法评价：方法简便，灵敏度高，结果直观、无需特殊仪器 3、凝集试验是一个定性或半定量的检测方法 第一节 直接凝集试验 细菌、红细胞等颗粒性抗原直接与相应抗体结合，在适当电解质的作用下，出现肉眼可见的凝集现象。 (direct agglutination test) 直接凝集反应定义： 第一节 直接凝集试验 直接凝集反应的特点： 1、抗原呈颗粒状，制成的液体为悬液 2、抗原颗粒相对抗体大，故反应所 形成的凝集物主要成分为抗原。 3、抗原的比表面积比抗体大，试验时为使抗体不过甚，通常需要稀释抗体。 4、因为要稀释的是抗体，故以出现凝集现象的抗体最高稀释度判断效价。 直接凝集试验原理示意图 一 玻片凝集试验 1、原理及方法 试验 对照 阳性 阴性 阳性标准：出现凝集颗粒+液体变澄清 2方法评价：简便快速、多定性且敏感度低 3临床应用：菌种鉴定、血清学和血型鉴定 （已知抗体检测未知抗原） 二、试管凝集试验 常见：已知细菌抗原液检测血清相应抗体效价 1、原理 滴度：通常以产生++凝集现象的最高稀释度作为血清中抗体的效价，也称为滴度。 2、方法 ++++ +++ ++ ++ ++ 3、方法评价： 半定量试验简便、快速，敏感度低可有假阳性 4、临床应用： 肥达试验、外斐试验和交叉配血试验 三、与凝集反应有关的概念 O抗原（菌体抗原）结合抗体反应比较慢 H抗原（鞭毛抗原）结合抗体反应比较快 Vi抗原（表面抗原）包绕在菌体表面 第二节 间接凝集试验 (indirect agglutination test) 1、间接凝集试验的定义： 将可溶性抗原（或抗体）吸附于与适当大小的颗粒性载体表面，使之成为致敏颗粒，再与相应抗体（或抗原）作用，在适宜电解质存在的条件下，出现肉眼可见的特异性凝集现象。也称为被动（passive）凝集反应。 2、载体(carrier)： 指试验体系中与免疫无关，可以吸附抗体或可溶性抗原的颗粒。 3、致敏（sensitization）： 可溶性抗原(或抗体)吸附或偶联于颗粒载体表面的过程。 4、致敏颗粒（sensitized particle): 指吸附有已知可溶性抗原或抗体的载体颗粒 一、间接凝集试验基本类型 根据致敏载体用的是抗原或抗体以及凝集反应方式，分如下三类 1、正向间接凝集试验 2、反向间接凝集试验 3、间接凝集抑制试验 特点：抗原致敏载体检测标本中相应抗体 特点：抗体致敏载体检测标本中相应抗原 特点：抗原致敏载体与相应抗体作为诊断试剂，用于检测标本中是否存在与致敏抗原相同的抗原。 1 2 3 第三节其他凝集反应 协同凝集试验 抗人球蛋白凝集试验 自身红细胞凝集试验 (一)协同凝集试验 特殊载体：葡萄球菌A蛋白SPA:SPA - Fc-IgG; 原理：抗体致敏SPA颗粒---测标本中相应抗原 应用： 微生物的快速诊断 注意： 要做阴性对照 载体：未经致敏的受检者新鲜红细胞 试剂：抗人O型红细胞的单克隆抗体 二、自身红细胞凝集试验 特点：受检标本为全血 原 理 临床应用：HIV检测、HBsAg检测 双功能抗体 三、抗球蛋白试验（Coombs试验） 1、相关概念 不完全抗体：多数是IgG类抗体，能与相应抗原特异性结合后因其分子量较小，不能出现可见的凝集现象。 Coombs试剂：是Coombs等人用与不完全抗体有共同抗原的免疫球蛋白免疫动物，获得的抗球蛋白抗体。 2、原理： （1）直接Coombs试验 3、技术类型 新生儿溶血症、自身免疫性溶血症等 （2）间接Coombs试验 输血前交叉配不相容输血后抗体检测和检测母体Rh抗体 直接凝集反应 间接凝集反应 玻片凝集试验 试管凝集试验 凝集反应 分类 正向间接凝集反应（ Ag ） 反向间接凝集反应(Ab) 间接凝集抑制反应(