玉米茎尖分生组织丛生芽高频诱导和再生体系建立.pdfVIP

玉米茎尖分生组织丛生芽高频诱导和再生体系建立.pdf

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卡米萃尖分牛组织从牛芽高频诱导和冉牛体系建立 目 录 摘 要………………………………………………………………………………………………………………….I Abs仃act……………………………………………………………………………………………………………….II 缩略语……………………………………………………………………………………III 1前言…………………………………………………………………………………………………………………1 1.1玉米转基因方法研究进展………………………………………………………1 1.1.1农杆菌介导的基因转化………………………………………………….1 1.1.2基因枪转化法…………………………………………………………….2 1.1.3 PEG介导法………………………………………………………………一2 1.1.4花粉管通道法…………………………………………………………….2 1.1.5子房注射法……………………………………………………………….3 1.1.6茎尖直接转化法………………………………………………………….3 1.1.7电激法…………………………………………………………………….4 1.2玉米转化受体的选择……………………………………………………………4 1.2.1愈伤组织………………………………………………………………….4 1.2.2原生质体………………………………………………………………….5 1.2.3悬浮细胞系……………………………………………………………….5 1.2.4外植体…………………………………………………………………….6 1.3本课题的研究目的和意义………………………………………………………6 2实验材料与方法……………………………………………………………………….8 2.1实验材料…………………………………………………………………………8 2.1.1成熟胚材料……………………………………………………………….8 2.1.2转化用质粒……………………………………………………………….8 2.1.3主要培养基配方………………………………………………………….8 2.2方法………………………………………………………………………………………………………10 2.2.1组织培养方法……………………………………………………………10 2.2.1.1种子的无菌处理及萌发………………………………………….10 2.2.1.2茎尖分生组织丛生芽的诱导与继代……………………………..10 2.2.1.3茎尖分生组织丛生芽的分化与生根……………………………..10 0 2.2.2组织学观察………………………………………………………………1 2.2.2.1取样与固定……………………………………………………….10 2.2.2.2扫描电镜镜检及照相…………………………………………….11 2.2.3基因枪转化,筛选及检测………………………………………………11 华I}-农、Ip大学2012届硕二仁研究牛学位论文 2.2.3.1转化受体的准备…………………………………………………..11 2.2.3.2微弹的制备………………………………………………………..11 2.2.3.3基因枪准备及轰击………………………………………………..12 2.2.3.4转基因丛生芽的PCR检测………………………………………12 5 3结果与分析……………………………………………………………………………1

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