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卡米萃尖分牛组织从牛芽高频诱导和冉牛体系建立
目 录
摘 要………………………………………………………………………………………………………………….I
Abs仃act……………………………………………………………………………………………………………….II
缩略语……………………………………………………………………………………III
1前言…………………………………………………………………………………………………………………1
1.1玉米转基因方法研究进展………………………………………………………1
1.1.1农杆菌介导的基因转化………………………………………………….1
1.1.2基因枪转化法…………………………………………………………….2
1.1.3
PEG介导法………………………………………………………………一2
1.1.4花粉管通道法…………………………………………………………….2
1.1.5子房注射法……………………………………………………………….3
1.1.6茎尖直接转化法………………………………………………………….3
1.1.7电激法…………………………………………………………………….4
1.2玉米转化受体的选择……………………………………………………………4
1.2.1愈伤组织………………………………………………………………….4
1.2.2原生质体………………………………………………………………….5
1.2.3悬浮细胞系……………………………………………………………….5
1.2.4外植体…………………………………………………………………….6
1.3本课题的研究目的和意义………………………………………………………6
2实验材料与方法……………………………………………………………………….8
2.1实验材料…………………………………………………………………………8
2.1.1成熟胚材料……………………………………………………………….8
2.1.2转化用质粒……………………………………………………………….8
2.1.3主要培养基配方………………………………………………………….8
2.2方法………………………………………………………………………………………………………10
2.2.1组织培养方法……………………………………………………………10
2.2.1.1种子的无菌处理及萌发………………………………………….10
2.2.1.2茎尖分生组织丛生芽的诱导与继代……………………………..10
2.2.1.3茎尖分生组织丛生芽的分化与生根……………………………..10
0
2.2.2组织学观察………………………………………………………………1
2.2.2.1取样与固定……………………………………………………….10
2.2.2.2扫描电镜镜检及照相…………………………………………….11
2.2.3基因枪转化,筛选及检测………………………………………………11
华I}-农、Ip大学2012届硕二仁研究牛学位论文
2.2.3.1转化受体的准备…………………………………………………..11
2.2.3.2微弹的制备………………………………………………………..11
2.2.3.3基因枪准备及轰击………………………………………………..12
2.2.3.4转基因丛生芽的PCR检测………………………………………12
5
3结果与分析……………………………………………………………………………1
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