抑癌基因P21CIP1／WAF1研究进展.docVIP

抑癌基因P21CIP1／WAF1研究进展 j一曲c困 医学综述{1999年第5卷第7期 )王lff手悖棚扭 抑癌基因P21CIP1/WAFI研究进展 山东医科大学附属院(济南2500L2)张维冷延华综述荆梦杰审挂 —— 一 ———一 近年来,细咆周期调控对肿瘤发展的影响越来越受 瓠人们的关注.细胞胤期调控有关的分子有:细胞厨刺 蛋白(c,vcin),细咆周期蛋白依赖性激酶(cyclindepen dentkinase,CDK).磷酸化酶和细胞周期蛋白依赖徽 酶抑制蛋白(eye]independentkinaseinhibitor.CDI),其 中.cyclin的周期性积累与分解对细胞周期进程起着决 定性作用.而CDI通过在细胞周期适当的时间点E负 调节CDK的活性.从而在细胞周期的进程中起着关键 性作用.CDI可划分为二大粪:一粪为CIP/KIP,包括 p21,p27及p57三种细胞周期抑制蛋白.可抑制eyclin edk复合物:另一类为Ink4.包括p15,p16,p18,P19.叮 抑制CDK4/CDK6.有关研究表明,p21Cip1/War1参与 细胞的多种功能活动,在细胞生长调控中发挥极重要的 作用本文就p21Cip1.Wall的研究现状做简述. 1p21的发现及一般性扶 X[ong等在一个二倍体人成纤维细胞系W138中与 eyeltnD1.CDK2,4或5一起通过免疫沉淀分离出来p21 蛋白质.并发现p21与c.vclinD1/cyclin1)3,edk2/cdk4., cdk5,增殖细胞核抗原(proliferatingcellnuclearanti gen,PCNA)结合成为四价复告体.1993年,Harper等 通过一次杂交筛选体系研究发现周期蛋白依帻性激酶 相互作用蛋白1(CDKinteracting,protenl,Cip1基因 cDNA.E1一Deiry等用差碱杂交法研究野生型p53诱 导蛋白时,分离出野生型p53激活片段Wafl(Wild—type P53actJvatedfragment)1.].同时,Noda等在细瞻老化过 程中发现了抑制蛋白Sdi{(senescentcell—derivedin hihitor1)一.经比较发现Cipl,Waf1和Sdil均产生p11 蛋白.故称为p21基因: p21基阔定位于几第6号染色体短臂的2带1iX (印21.2),DNA长度为85kb,有3/r外显产,分昌_J为 68bp,4S0bp和160obp.转译起始信号位于第2号较长 外显子晦.其eDNA长约2.1kb在p21基田上饼分 制约2.4kb和8kb处.各有一个p53蛋白特殊结台值 . p21基因编码一富含精氪酸并有164十氨基酸组成 的蛋白.藏置自在第13--41号氮基酸之间有一半胱茸 酸富含区C(xjC(x)C(x)C构成锌指结构.p2I 蛋白N端结合并抑制cyelin—cdk.而c端则结告并抑制 PCNA,中旧』cdk2结合 2p21的生物学特点 7弓2f 2.1p21的摹本生物学作用一般认为.细胞期的 正常演进依赖于周期蛋白和抑制蛋自的蛹节而完成=具 体为二者对CDK的正负平衡调节作用.而p21妁摹表 功能则为:在G1期如DNA受损.p21可通过抑制C1)K 的活性而阻碍细胞进入s期如DNA损伤在S期.p21 可通过使pcNA失活而停止DNA合成.从而让细胞修 复. p21结合并抑制许多型eyclin—cdk复台体.包括c olin】)cdk4,cyclinAcdk2,eyelinE—cdk2.其中对edk4 的抑制较强Xiong等在人的二倍体成纤维细胞研究 中,发现p21与多种cyclin—cdk复合物结合在起.并 推测p21通过抑制cyclincdk活性,阻止增殖细胞G1 向s期过蘸.此外,转录因子E2F可促进细咆进^s 期.而去磷酸化的Rb蚩门(retinblastomaprotein)能与 E2F形成复合物并抑制其转录活性.p21则叮通过抑制 cyclincdk对Rb蛋白的磷酸化.使Rb蛋门去磷酸化. 脯而抑制细胞周期G1向S的过渡.近来,有的学者研 究发现,p21还可在G2/M期阻止细胞周期.导致细胞 隹长抑制,其作用机制尚未清楚. 研究发现.p21可在无cyclincdk的情况F通王二与 PCNA结台而抑制后者活性,嫩活DNA多聚酶8.从而 抑制DNA复制=Waga等通过SV40真棱细盹DNA体 外复制研竞发现,在去除cydin和cdk情况.p21可 直接抑制依赖PCNA的DNA复制PCNA是DNA聚 合酶8的功能亚基,在DNA复制与修复中发撵重要作 用p2l通过抑制PCNA而直接阻止DNA复制,伯p21 却不能抑制PCNA在DNA修复中的作用吲此.j细 胞DNA损伤后,细胞被阻L