α-淀粉酶菌株摇瓶发酵初筛与酶活力测定.pptVIP

α-淀粉酶菌株摇瓶发酵初筛及酶活力测定 目的要求 了解利用微生物摇瓶发酵初筛的目的。 了解发酵用培养基的配制要求。 掌握碘比色法（部颁标准）测定α-淀粉酶活力的原理和方法步骤。 发酵培养基（100mL装于500mL三角瓶） 可溶性淀粉 8g； 豆粕粉 4g； Na2HPO4 .12H2O 0.8g； （NH4）2SO4 0.4g； CaCl2 0.2g NH4Cl 0.15g； CaCO3 0.15g 水100mL 121.3℃灭菌20分钟 发酵培养基配制说明 三角瓶规格要统一。 先将不溶解的可溶性淀粉、豆粕粉、 CaCO3分别称于500mL三角瓶。 将无机盐称量后先溶解于水中，调节pH为7.0~7.5，再用量筒量取100mL加于三角瓶中，轻摇混匀。 121.3℃灭菌20分钟 灭完菌后取出，要马上轻摇混匀（？）。 种子培养基（下周使用） 可溶性淀粉 3g； Na2HPO4 .12H2O 0.4g； （NH4）2SO4 0.2g； CaCl2 0.2g NH4Cl 0.15g； 4%豆粕粉浸出液 100mL 煮沸使淀粉溶解后，取50mL分装于250mL三角瓶（2瓶）包扎；取5mL分装于18×180mm试管中（5支），加塞包扎。 121.3℃灭菌20分钟 其它器材 1mL无菌吸管 10支 2mL