高效液相色谱法测定食品中脱氢乙酸不确定度评定.docVIP

编 号 JHZJY/BP(SL)-02-2009 金华市质量技术监督检测院 页码 第1页共6 页 类 别 不确定度评定报告 编制 版本及修订次数 第G版第0次修订 高效液相色谱法测定食品中脱氢乙酸不确定度评定 审核 指 导 场 所 食品理化检测中心 批准 适 用 岗 位 食品理化检测岗位 批准日期 年 月 日 作 业 指 导 书 内 容 近年来, 脱氢乙酸被广泛的用做食品中的防腐剂, 其特别对霉菌和酵母的抑菌能力强, 为苯酸钠的2~10倍。目前测定饮料中脱氢乙酸的方法为: GB/T23377- 2009《食品中脱氢乙酸检测高效液相色谱法》。该方法操作简便, 测定结果准确。不确定度是检测技术的重要概念, 也是保证检测结果质量的关键要素。随着经济发展全球化, 不确定度是国际检测实验室之间互认和通用准则接轨的基础。本报告对使用高效液相色谱法测定果汁饮料中脱氢乙酸的结果进行了不确定度评估, 并对影响不确定度评估因素进行了逐项分析。 一、实验部分 (一)仪器 1.测试仪器:Agilent 1200series 2.色谱柱：ZORBAX Eclipse XDB-C18 (二)测试过程 采用GB /T 23377- 2009《食品中脱氢乙酸的测定高效液相色谱法》测定饮料中的脱氢乙酸含量。样品的处理与测定: 精密称取3 g试样, 置于50 ml量瓶中, 加入10 ml水, 加入2%的氢氧化钠溶液调pH 值至7~ 8,加水稀释至刻度, 摇匀。再精密量取20 ml至25 ml量瓶中, 加10%甲酸溶液调pH 值至4~ 6, 加水稀释至刻度, 摇匀。取5 ml过已经活化的固相萃取柱, 用5 ml水淋洗, 再用70%的甲醇溶液洗脱, 收集洗脱液约8 ml至10 ml量瓶, 并用70%的甲醇溶液定容, 摇匀即得。 对照品贮备液配制: 精密称取对照品92.78 mg, 置于100ml容量瓶中, 用10 ml 2% 的氢氧化钠溶液溶解, 加水稀释至刻度, 摇匀即得。线性标准溶液的配制: 精密量取对照品贮备液5 ml、5 ml分别置于( DZ1) 50 ml、( DZ2) 100 ml量瓶中, 用水稀释至刻度, 再从DZ2 中精密量取5 ml、5 ml、1 m l分别置于10 ml、50 ml、100 ml量瓶中, 用水稀释至刻度, 摇匀即得。 二、不确定度评定过程 (一)数学模型 式中: X为样品中脱氢乙酸的含量（g /kg），Cs为样品供试溶液中脱氢乙酸的浓度（μ g /ml）；m为样品取样量（g）; V50、V25、V20为分别为样品稀释所用量瓶和单标线吸管体积50 ml、25 ml、20 ml。 数学模型中各项的值列在表1中： 编 号 JHZJY/BP(SL)-02-2009 金华市质量技术监督检测院 页码 第2页共7 页 类 别 不确定度评定报告 编制 版本及修订次数 第G版第0次修订 高效液相色谱法测定食品中脱氢乙酸不确定度评定 审核 指 导 场 所 食品理化检测中心 批准 适 用 岗 位 食品理化检测岗位 批准日期 作 业 指 导 书 内 容 用HPLC法测定上述五种线性标准溶液中脱氢乙酸的峰面积，每个浓度测定2次，结果见表2。 (二)不确定度分量的主要来源 由测试过程以及数学模型可知，样品中脱氢乙酸测量结果不确定度来源主要有以下几个方面： （1）Cs引入的不确定度。 （2）20ml单标线吸管引入的不确定度。 （3）25ml量瓶引入的不确定度。 （4）50ml量瓶引入的不确定度。 （5）样品取样量m引入的不确定度。 (6)其他不确定度来源。 (三)不确定度分量的评定 1. Cs的不确定度 Cs的不确定度由两个部分构成, 一是由标准曲线求得Cs时产生的不确定度；二是由对照品配制成五种质量浓度标准溶液时产生的不确定度。 由标准曲线求得Cs时产生的不确定度 对表2中的数据进行线性拟合得直线方程:： C-标准溶液的质量浓度；A-标准溶液的峰面积 对Cs进行2次HPLC测量，由峰面积通过直线方程求得Cs= 3.048 μg /m l，则Cs的标准不确定度为： 编 号 JHZJY/BP(SL)-02-2009 金华市质量技术监督检测院 页码 第3页共7 页 类 别 不确定度评定报告 编制 版本及修订次数 第G版第0次修订 高效液相色谱法测定食品中脱氢乙酸不确定度评定 审核 指 导 场 所 食品理化检测中心 批准 适 用 岗 位 食品理化检测岗位 批准日期 作 业 指 导 书 内 容 将上述各值代入Cs的标准不确定度公式中得出: ②由对照品配制成标准溶液时所产生的