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实时荧光定量PCR技术在转基因食品检测领域中的应用 生物技术通讯… .22LETFERSINBIOTECHNOLOGYVol22一-No.4J—u1..2—0—11-?-?Il575 doi:10.39694.issn.1009—0002.2011.04,028综述 实时荧光定量PCR技术在转基因食品检测领域中的应用 吴永彬,肖维威,马文丽 南方医科大学基因工程研究所,广东广州510515 [摘要]随着基因工程技术在农业生产中应用的深入,越来越多具有改良特征的转基因植物在全球范围内得到广 泛种植,随之而来的转基因食品也迅猛发展,转基因产品大规模商业化引起了对安全性问题的担忧.为保证转基因 产品标签制度的顺利实施,建立快速,准确,高通量的定量检测方法十分必要.我们综述了国内外转基因食品检测技 术的研究进展,重点阐述了实时荧光定量PCR技术在转基因食品检测领域中的应用,并展望了通过构建质粒标准 分子的方法来实现对更多转基因植物品系的定量检测. [关键词]转基因食品;实时荧光定量PCR;质粒标准分子;检测方法 [中图分类号]Q789[文献标识码]A[文章编号]1009-0002(2011)04—0575-05 DevelopmentofReal-TimeFluorescentQuantitativePCRinthe FieldofGeneticallyModifiedFoodDetection Yong-Bin,XIA0Wei—Wei.MAWen-Li InstituteofGeneEngineering,SouthernMedicalUniversity,Guangzhou510515,China [Abstract]Withwideapplicationofgeneticengineeringtechnologyinagricuhuralproduction,moreandmoreim— provedcharacteristicsoftransgenicplantshavebeenwidelyplantedOilaglobalscale,followedbygenetically modified(GM)foodshavetobedevelopedrapidly.Becauseofsecurityissuescausedbylarge—scalecommercializa— tionofGMproducts,andensuringGMOlabelingsystemimplementsmoothly,arapid,accurate,high—throughput quantitativeassayisnecessary.InthispaperwereviewedthedevelopmentofGMfoodsdetectionathomeand abroadresearchprogress,andfocusedontheapplicationofreal—timefluorescentquantitativePCRinthefieldof GMfoodsdetection,andinitsapplicationprospects,constructingstandardreferencemoleculeswereproposedto achievemoretransgenicplantlinesforquantitativedetection. [Keywords]geneticallymodifiedfood;real—timequantitativePCR;standardreferencemolecule;detectionmethod 转基因食品也称基因改造食品或基因修饰食 品(geneticallymodifiedfood,GMF),主要是指利用 基因工程技术改变基因组构成,将某些优良的外源 基因导人植物,动物或微生物体内,改造其遗传物 质,使其性状,营养价值或品质向人们所需目标转 变,从而获得其产品或以其为原料进行加工后得到 的食品.目前,转基因作物种植国家已从1996年的 6个增至25个n1,但转基因食品的安全性问题存在 诸多争议,因此,对转基因产品需要进行有效的标 识管理,对其中的外源基因含量须加以限制,这些 都离不开准确有效的基因检测技术. 当前,对转基因食品检测的技术路线主要有2 条,一是对外源基因表达产物进行检测,二是直接 检测外源基因.其中,对外源基因序列的检测最为 常见.对外源基因表达产物蛋白质检测的常用方法 有酶联免疫法(ELISA),蛋白质印迹法(Western blot)等.而对外源基因序列的检测,主要是以核酸为 基础的PCR方法.随着检测手段不断提高,转基因 食品检测已从定性提高到定量水平嘲.近年发