第八章-发酵过程控制4教学文稿.ppt

第四节 发酵过程的pH控制 ;一、发酵过程pH变化的原因 ;二、pH对发酵的影响 ;pH;例：培养基初始pH值对漆酶分泌的影响;2、pH对发酵的影响 ;（4）pH影响代谢方向 pH不同，往往引起菌体代谢过程不同，使代谢产物的质量和比例发生改变。例如黑曲霉在pH2~3时发酵产生柠檬酸，在pH近中性时，则产生草酸。 谷氨酸发酵，在中性和微碱性条件下积累谷氨酸，在酸性条件下则容易形成谷氨酰胺和N-乙酰谷氨酰胺 ;3、pH在微生物培养的不同阶段有不同的影响 ;;pH对海藻糖水解酶产生的影响;pH对谷氨酰胺转氨酶活力的影响;热凝胶产生不同阶段pH的考察;从图中可见，热凝胶发酵菌体生长和热凝胶合成是非偶联的，整个发酵过程可以分成两个阶段：前10 h是菌体生长期，之后热凝胶开始合成，至发酵结束是热凝胶合成期。 在菌体生长期，DO 直线下降，培养液中的pH也迅速下降。10 h左右，菌体质量浓度达到最大值，DO 和pH降至最低点（5.4～5.6），菌体生长结束。此后进入热凝胶合成期。;发酵过程控制;稳定期随着pH降低，糖耗速率增加，生物量增加，但产物合成速率在pH5.6时达到最高。说明当pH小于5.6以后微生物消耗的糖并非用于合成热凝胶，而是合成菌体。;三、pH的控制 ;在发酵过程中根据糖氮消耗需要进行补料。在补料与调pH没有矛盾时采用补料调pH 如（1）调节补糖速率，调节空气流量来调节pH (2)当NH2-N低，pH低时补氨水； 当NH2-N低，pH高时补(NH4)2SO4; 分别在4种缓冲介质中，于pH 6．50一9．50测定天冬酰胺酶酶活力． 1 甘氨酸介质pH 8.00时酶活力最高； 2 硼酸在pH 8．50，酶反应最快 3 磷酸在pH 8．50，酶反应最快 4 Tris在pH 8．50，酶反应最快 酶活1＞2＞4＞3;不同pH控制方式对目的突变株ISw330异亮氨酸摇瓶发酵的影响，结果如图所示。 “1”表示只加CaC03控制pH值，“2”表示只加尿素控制，“3”表示CaC03和尿素联合控制pH值。;例：pH对L-异亮氨酸发酵的影响（天津科技大学）;不同pH值对菌体的形态影响很大，当pH值高于7．5时，菌体易于老化，呈现球状；当pH值低于6．5时菌体同样受抑制，易于老化。而在7．2左右时，菌体是处于产酸期，呈现长的椭圆形；在6．9左右时，菌体处于生长期，呈“八”字形状并占有绝对的优势。;发酵过程控制;pH6．9时，菌体生长旺盛，pH7．15时，对菌体的产酸有利。因此，在发酵的产酸期产酸较高。采用阶段pH控制模式进行发酵，在发酵中前期控制pH6.9，到48h后pH值为7．15，到80h后pH值为7．25。产率22．27g·/L，产酸率提高12．23％。;例：克拉维酸发酵中pH变换控制;研究不同pH对发酵的影响 分别配置pH为6.0，7.0，8.0的培养基测定菌的生长和产物合成;pH8.0时生长良好 产量低，产物降解;控制pH7.0和8.0时，最高细胞浓度接近相同(约16％PMV)，但控制pH6．0时细胞生长受抑制。 在2．5升生物反应器内， 不控制pH时2．47μg／(m1·h ) 控制pH7.0时的产率3．37μg／(m1·h) 最高 控制pH8.0时，产率2．02μg／(m1‘h) 在控制pH6．0时，CA产生被抑制,但降解少 因此对细胞生长和CA产生最好将pH控制于7.0，但在控制pH7.0时，仍出现CA的迅速分解。 ;由于CA生产的最适pH和减少CA分解的pH各不相同，因此在分批发酵中应用了pH变换策略，使发酵pH由中性pH7．0变换为酸性pH6.0。 在发酵前期，在细胞生长和产生CA期间控制pH7.0，4d后，当CA产量达最高值时，变换pH为6.0，以减少CA分解。最高CA浓度可保持24h。由于改变pH，使CA分解速率明显降低。 ;发酵过程控制;pH控制是一项非常细致的工作，不仅???虑最佳pH值，而且要根据生长阶段考察对pH的要求。在pH控制中还要采用合适的调节方法。;小 结;对发酵的影响;pH的控制方式;思考题 7.12 发酵过程中pH会不会发生变化为什么？ 7.13 pH对发酵的影响表现在哪些方面？ 7.14 为了确定发酵的最佳pH,我们该如何实验？ 7.15 发酵过程的pH控制可以采取哪些措施？