shagnke血红蛋白的提取和分离.pptVIP

教学目标 教学重点 教学难点 理解色谱法、电泳法等分离大分子的基本原理 了解缓冲液的组成及其作用 血红蛋白的分离－－样品处理 凝胶色谱法的原理 电泳法分离大分子的原理 一、基础知识――蛋白质提取和分离原理 蛋白质提取与分离的依据－－蛋白质的物化理性质： 形状、大小、电荷性质和多少、溶解度、吸附性质、 亲和力等千差万别。 提取分离方法 凝胶色谱法 凝胶电泳法 1.凝胶色谱法 （1）原理： 大分子通过多孔凝胶颗粒的间隙，路程短，流动快； 小分子穿过多孔凝胶颗粒的内部，路程长，流动慢。 当不同的蛋白质通过凝胶时 相对分子质量较小 相对分子质量较大 凝胶内部的通道 容易进入 无法进入凝胶内部的通道 只能在凝胶外部移动 路程较长 移动速度较慢 路程较短 移动速度较快 相对分子质量不同的蛋白质因此得以分离。 1.凝胶色谱法 （3）分离过程 混合物 上 柱 洗 脱 大分子流动快 小分子流动慢 收 集 大分子 收 集 小分子 洗脱：从色谱柱上端不断注入缓冲液， 促使蛋白质分子的差速流动。 多孔性的多糖类化合物，如葡聚糖、琼脂糖。 （2）材料 4.凝胶色谱法分离蛋白质的原理和具体过程 二、缓冲溶液 在一定范围内，能够抵制 对溶液PH值的影响，维持PH 不变。 1.作用