槐米中芦丁的提取分离与鉴定.pptVIP

实训目的 能够运用碱溶酸沉法和结晶法的操作技术对槐米中的芦丁进行提取分离 能够运用酸水解的操作技术对槐米中芦丁进行水解 能够运用纸色谱、薄层色谱法和化学法鉴别芦丁、槲皮素和糖类化合物 定性反应 盐酸-镁粉反应 将样品溶液1ml，先滴加1－2滴浓盐酸再加入少许镁粉振摇，1-2min内，观察颜色变化。（注意顺序） Molish反应 将样品溶液1ml，加入与样品等体积10%α-萘酚溶液，倾斜试管，摇匀，沿管壁滴加适量浓硫酸（约2ml），至分层注意观察两界面产生的变化。（不要摇动） 黄酮母核 苷类 芦丁的提取分离与鉴定 FeCl3反应 酚羟基 将样品溶液1ml，加入1～2滴2%Fecl3溶液，观察现象。 思考问题 1、纸色谱的原理及操作要点？ 2、黄酮类化合物有哪些显色方法，各针对哪类黄酮？ 3、黄酮类薄层色谱中，经常用到的吸附剂有哪几类？各自的原理有什么不同？ 4、黄酮类薄层色谱中常用到AlCl3乙醇溶液显色？显色后一般呈什么颜色？ 5、薄层色谱的操作要点有哪些？ 子项目四 芦丁和槲皮素的鉴别 所需要的药品和设备：氢氧化钡、葡萄糖、鼠李糖、正丁醇、乙酸、苯胺、邻苯二甲酸盐、无水乙醇、甲醇、乙酸乙酯、甲酸、AlCl3、镁粉、浓盐酸、 α-萘酚溶液、浓硫酸、三氯化铁、紫外灯、新华1号滤纸、点样毛细管、水浴锅、硅胶G预制板11块、分液漏斗 喷雾器几个 每组需要：1个蒸发皿、玻璃漏斗、玻璃棒、10ml试管8支、2个小烧杯、胶头滴管 需要配制的试剂: 1 苯胺—邻苯二甲酸试剂配法：苯胺0.93g和邻苯二甲酸1.66g溶于100ml水饱和的正丁醇中。 （我们实验需要配100ml）(用分液漏斗中加入50ml水和 100ml正丁醇震摇后静置取上层即为水饱和的正丁醇） 2 10%α-萘酚乙醇溶液 25ml 3 2%三氯化铁乙醇溶液 20ml 4、展开剂：醋酸乙酯-甲酸-水（8：1：1）（我们实验需要配300ml 5、5组配一瓶配200ml正丁醇-乙酸-水（4：1：5）放到分液漏斗中，平衡后取上层备用 配两瓶 6、 2%AlCl3乙醇溶液 100ml 7、硅胶预制板，用之前105度烘半个小时。 子项目三 芦丁和槲皮素的鉴别 芦丁的提取分离与鉴定 水解所得滤液20ml 用饱和Ba(OH)2调PH值至中性，折叠滤纸过滤 残渣 滤液 蒸干，放冷 加2-3ml乙醇溶解 供试品溶液 纸色谱 糖的鉴定 糖的纸色谱鉴定 标准品：葡萄糖、鼠李糖 展开剂：正丁醇-乙酸-水（4：1：5）上层液 显色剂：苯胺—邻苯二甲酸试剂。 105℃烘10min显色(显棕色或棕红色斑点) 芦丁的提取分离与鉴定 新华一号滤纸 标本缸 倒入缸内约30毫升的展开剂 糖的纸色谱鉴定 标准品：葡萄糖、鼠李糖 展开剂：正丁醇-乙酸-水（4：1：5）放到分液漏斗中，平衡后取上层备用。 显色剂：苯胺—邻苯二甲酸试剂。 105℃烘10min显色(显棕色或棕红色斑点) 芦丁的提取分离与鉴定 试验记录： １ ２ ３ 当溶剂走到溶剂前沿6－8cm即可，约需40分钟 粘附纸色谱，并计算斑点的Ｒf值 薄层色谱鉴别 样品：分别取精制的芦丁、槲皮素适量，加95%乙醇溶解成每1ml含1mg的溶液，备用。 展开剂：醋酸乙酯-甲酸-水（8：1：1） 显色剂：2%AlCl3乙醇溶液，105℃加热至斑点清晰，置紫外灯(365nm)下观察。 颜色 直接观察 AlCl3 喷雾 Rf值 日光 UV 日光 UV 样品 芦丁 槲皮素 芦丁的提取与定性反应 实验记录 注意：硅胶预制板，用之前105度烘半个小时。 实验规则 1、预习实验内容：要明确实验目的与要求。对处方中药物性质、配制原理、操作步骤、操作关键等，做到“心中有数”，并合理安排实验时间。 2、遵守实验纪律：应保持实验室内肃静，不得无故迟到或早退，不得擅离实验操作岗位，甚至高声谈笑。如发生差错事故或异常现象，应随时报告指导教师，查明原因，及时解释。注意安全，严防火灾、烧伤或中毒事故发生。 3、杜绝差错事故：称取药品时，要在拿取、称量和放回时进行核对。称量完毕应盖好瓶塞，放回原处。实验成品应写明名称、规格、配制者、配制时间及班组号，交实验指导教师验收。 实验规则 4、爱护仪器药品：实验仪器、药品应妥善保管、存放和使用。如有破损缺少，必须立即报告实验指导教师，并填写仪器药品报损表，然后到准备室补领。实验小组合用的仪器药品，每次实验前应检查核对后再取用。实验指导教师对破损缺少的仪器药品应查明原因，按本院校对仪器药品破损处理办法提出处理意见。 实验规则 打破玻璃器皿和试备要赔偿！ 5、保持室内整洁：学生进入实验室必须穿戴工作衣帽。实验完毕应将本组实验台、