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RS—AOZ—11
地址:广州市番禺区市新路新水坑 电话:020 传真:020 E-mail :ruisenbiotech@163.com
广州瑞森生物科技有限公司
呋喃唑酮(AOZ)酶联免疫检测试剂盒说明书
地址:广州市番禺区市新路新水坑段6号B座5楼 电话:020 传真:020 E-mail :ruisenbiotech@163.com
反应原理
呋喃唑酮酶联免疫检测试剂盒,主要是利用抗原与抗体的特异性免疫化学反应的基本原理来进行的,换句话说,就是利用酶标记物与样品中的呋喃唑酮与微孔中的抗体进行竞争反应。在整个反应当中,如果样品中的呋喃唑酮残留的越多,相对地就会竞争反应越多的酶标记物,使得能结合上抗体的酶标记物相对地减少,用TMB底物显色,样品中的呋喃唑酮含量与样品的吸光度值呈反比,与标准曲线比较即可得出呋喃唑酮含量。
【试剂盒组份】
1、酶标板:8孔/条,12条/板
2、呋喃唑酮标准溶液(1.3 mL / 瓶):0 ppb、0.025 ppb、0.05 ppb、0.1 ppb、0.2 ppb、0.5 ppb ;10ppb.
3、10倍浓缩缓冲液……………………………………50 mL
4、10倍浓缩清洗液…………………………………… 50 mL
5、400倍呋喃唑酮浓缩酶标记物 ……………………………150 μL
6、显色液 ……………………………………………… 12 mL
7、反应终止液 ………………………………………… 13 mL
8、衍生剂……………………………………………… 12 mL
【试剂盒技术指标】
试剂盒灵敏度: 0.025ppb
样本检测下限:
鱼……………………………………………………0.1 ppb
虾……………………………………………………0.1 ppb
生乳…………………………………………………0.1 ppb
蜂蜜…………………………………………………0.1 ppb
鸡肉………………………………………………………0.05 ppb
猪肉………………………………………………………0.05 ppb
猪肝………………………………………………………0.05 ppb
饲料……………………………………………………… 0.3ppb
鱼粉 ………………………………………………………0.3 ppb
交叉反应率:
呋喃唑酮…………………………………………… 100%
呋喃它酮……………………………………………0.1%
呋喃西林……………………………………………0.1%
呋喃妥因………………………………………………0.5%
回收率:
鱼、虾、鸡肉、生乳、饲料、鱼粉、猪肉、猪肝…… 80~120%
蜂蜜 ………………………………………70~130%
批间、批内变异系数:CV≤10%
【所需仪器和试剂】
所需仪器:酶标仪、离心机、均质机、微量移液器(单道20μl-200μl、100μl-1000μl、多道250μl)
所需试剂:乙酸乙酯(Ethyl acetate)正己烷(n-Hexane)1 N 盐酸溶液(HCl)1 N 氢氧化钠溶液(NaOH)
【样本前处理】
样品处理前须知:
(1)实验中必须使用一次性吸头,在吸取不同的试剂时要更换吸头。
(2)实验之前须检查各种实验器具是否干净,必要时可对实验器具进行清洁,以避免污染干扰实验结果。
样品处理 :
本试剂可检测鱼、虾、鸡肉、生乳、饲料、鱼粉、蜂蜜、猪肉、猪肝等残留的呋喃唑酮;
1、待测物为组织 (鱼肉、虾肉)、全蛋
衍生反应
取1 g已均质样品置入离心管中,加入4 mL H2O,0.5 mL 1 M HCl,100 μL 衍生试剂。
振荡混合约1分钟。
置37 ℃烘箱,静置过夜 (约16 h)
※ 水产样品可将衍生反应之步骤 3,时间可由37 ℃
16 h改为 60 ℃、3 h,以下萃取流程及操作步骤不变,但鱼、虾外添加的回收率会降低为70 ~ 110 %,如果是未知浓度之鱼、虾样品直接衍生60 ℃、3 h (非外添加),回收率则等于37 ℃、16h衍生
萃取流程
加入5 mL1×浓缩缓冲液,0.4 mL 1M NaOH,5 mL乙酸乙酯(Ethyl acetate)。
振荡混合约1分钟。
以离心机离心10分钟(3000 rpm)。
取2 mL上层液 (乙酸乙酯层)至10 ml玻璃试管。
于50℃下,利用氮气将乙酸乙酯吹干 (样品快速浓缩系统)
在此玻璃试管中加入1mL正己烷
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