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- 2019-08-17 发布于江苏
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DNA重组技术的基本工具 专题1第1节 一、基因工程的概念 (1)供体: (2)操作环境: (3)操作水平: (4)原理: (5)受体: (6)本质: (7)优点: 提供目的基因 体外 分子水平 基因重组 表达目的基因 性状在受体体内的表达 克服远缘杂交不亲和的障碍,定向改造生物的遗传性状 二、基因工程的基本工具 1.限制性核酸内切酶(简称:限制酶) ①来源: 主要是从原核生物中分离纯化出来 ②作用 识别特定的核苷酸序列并切开特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键 ③结果: 产生黏性末端或平末端 (2)DNA连接酶 ①种类: 按来源可分为E·coli DNA连接酶和T4DNA连接酶 ②作用: 将双链DNA片段“缝合”起来,恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键 ③DNA连接酶和限制酶的关系 (3)载体 ①种类: 质粒、λ噬菌体的衍生物、动植物病毒等 ②质粒的特点 能自我复制; 有一个至多个限制酶切点; 有特殊的标记基因 【典型例题1】限制性核酸内切酶、DNA连接酶等酶的作用 若要利用某目的基因(见图甲)和P1噬菌体载体(见图乙)构建重组DNA(见图丙),限制性核酸内切酶的酶切位点分别是BglⅡ(A↓GATCT)、EcoRⅠ(G↓AATTC)和Sau3AⅠ(↓GATC)。下列分析合理的是( ) A.用EcoRⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体 B.用BglⅡ和EcoRⅠ切割目的基因
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