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- 2019-08-17 发布于江苏
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专题一基因工程 第二节基因工程的基本操作程序 基因工程的基本操作程序 1、目的基因的获取 2、基因表达载体的构建 3、将目的基因导入受体细胞 4、目的基因的检测与鉴定 一、目的基因的获取 1、目的基因主要是指______________________ 编码蛋白质的结构基因 2、获取目的基因的常用方法 (1)从基因文库中获取 (2)利用PCR技术扩增 (3)人工合成 例如:苏云金杆菌抗虫基因、人胰岛素基因、人干扰素基因、植物抗病基因等 1、从基因文库中获取目的基因 将含有某种生物不同基因的许多DNA片断,导入到受体菌的群体中,各个受体菌分别含有这种生物的不同基因,称为基因文库。 基因文库 基因组文库 部分基因文库(CDNA文库) 某生物体内全部DNA 许多DNA片段 受体菌群体 基因组文库的构建 限制酶 与运载体连接 导入 基因组文库 某种生物某个时期的mRNA cDNA 反转录 受体菌群体 与运载体连接 导入 部分基因文库 (cDNA文库) cDNA文库的构建 (2)利用PCR技术扩增目的基因 PCR——聚合酶链式反应 是一项生物体外复制特定DNA片段的核酸合成技术。通过此技术使其数量呈指数方式增加,可获取大量的目的基因。 PCR技术 原理: 前提: 原料: 方式 DNA复制 一段已知目的基因的核苷酸序列 :以_____方式
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