红外光谱在生命科学中的应用.pptVIP

例 脂-胆固醇的相互作用 许多谱学试验的结果说明：胆固醇加入模型膜后会使脂相变峰变宽，表明脂烃链排列的破坏减少了相变中的协同性。红外谱的结果也证实了这一点。在主相变温度之下，CH2的对称和不对称伸缩振动频率在胆固醇存在的情况下会有所升高，表明烃链中gauche(扭转式)构象的比例增加。但在相变温度之上却相反，CH2的对称和不对称伸缩振动频率比纯脂都有所降低。 这说明在相变温度之上，胆固醇的加入会降低脂双层中gauche构象的比例。因此，胆固醇在相变温度之下起的作用是阻止脂烃链排列过于紧密，使其有一定活动余地，并促进gauche构象的产生；而在相变温度之上，胆固醇比较僵硬的固醇环限制了脂链的运动，降低了其构象的自由度，减少了链中gauche构象的数量。这样，脂双层的流动性即使在温度波动时也能维持在一定范围内。 例. 抗癌药物顺铂对DPPC脂质体相行为影响及其分子机理的研究。 顺铂全称为顺式二氯二氨铂，是一种广为应用的抗癌药物。顺铂在进入细胞与DNA起作用之前，首先会与膜作用。研究顺铂与膜的作用，对揭示顺铂的抗癌机理是很有意义的。沈子威等以DPPC脂质体为模型膜，利用DSC、IR、NMR等方法研究了顺铂对DPPC脂质体相行为的影响，初步探讨了顺铂与脂质体相互作用的分子机理。下面简单介绍顺铂与DPPC脂质体的IR研究结果。 从NaCl重水溶液中制备的DPPC脂质体和DPPC脂质体/顺铂混合物的红外谱图可以看出: 加入顺铂后，在1087cm－1处的峰发生变化， 1733 cm－1处的峰无改变； 磷脂极性头部中磷酸基团的对称伸缩振动?s(PO2－)峰在~1090cm－1附近， 1733 cm－1是羧基 C=O的伸缩振动峰； 因此认为顺铂作用位点不在羧基 C=O上，而是与PC极性头部的磷酸基团发生作用。 作者还通过核磁共振和差示扫描量热测量的结果分析得出初步看法: 顺铂的氨配基与磷脂分子极性头部的磷酸基团通过氢键发生作用。一个顺铂分子有两个氨配基，可以结合两个磷脂分子，从而影响磷脂分子极性头部运动的自由度，改变脂质体的预相变温度。但顺铂没有破坏脂质体的双层结构，对磷脂分子的烃链和脂质体的主相变温度没有影响。 例. 磷脂的热相变研究 。 在磷脂的行为中研究最多的可能是磷脂的热相变，以DPPC为例，它至少有三个相变点： 亚相变 预相变 主相变 凝胶相----------亚凝胶相-----------第二凝胶相------------液晶相 15-20℃ 35℃ 40-42℃ ? 这三个相变都可以从红外谱上看到变化。亚凝胶相（sub-gel）时的CH2不对称和对称伸缩振动峰分别为2850和2920cm－1，两个峰都比较窄，表明烃链排列紧密。但仅从CH2和CH3的不对称和对称伸缩振动还难以确切地分清烃链的排列情况。 以某些碳氢化合物作为模型进行的研究提示：CH2的面外摇摆（710-740 cm-1）和剪切振动（1450-80 cm-1）可能表示了脂膜中烃链结构单元（晶胞）的类型，例如在低温下，DPPC的CH2面内摇摆和剪切振动峰分别728和1473cm-1，这和简单碳氢化合物三斜晶系的亚晶胞的相应谱峰峰位是可比的。DPPC在亚凝胶相时的谱也表明：其磷脂头部的水化程度有所减少。 相变温度之下，CH2对称和不对称伸缩振动峰分别为2850和2920 cm-1，随着温度的升高，前者移至2853 cm-1，且半高宽显著增加，后者也有类似变化。n-链烷熔融时也有类似的谱学变化，其结构变化是烃链由gauche构象向all trans构象的转变。谱峰的展宽是由于烃链中出现弯折，加大了烃链的活动余地；而峰位则取决于链中gauche构象的数量。主相变也会引起磷脂C=O基团振动峰的变化。主相变时，C?O基团在低波数区的吸收峰强度可逆性地增加，表明C=O基团上氢键有增加。这可能是由于在相变温度之上脂双层排列会有一定程度的破坏，脂的水化程度因此有所提高。 酰胺Ⅱ带位于1546 cm-1，由相变温度之上快速冷却形成亚稳态后，较低频率的酰胺Ⅰ带分量消失，只在1630 cm－1处见到一个微弱的肩峰。这说明C?O基团的氢键强度减弱，酰胺Ⅱ带频率移到1550 cm－1也说明了这一点。C-O伸缩振动在产生亚稳态时也有显著变化。 X射线衍射和热分析的结果提示：脑苷脂亚稳态的生成伴随着脂双层的脱水。比较脱水的和亚稳