中药生物技术介绍ppt课件下载.pptVIP

中药生物工程与技术课程复习 生物技术的定义 　（1）是应用自然科学及工程学的原理，依靠微生物、动物、植物体作为反应器，将物料进行加工以提供产品来为社会服务的技术。 　（2）即生物工程，是指以现代生命科学为基础，结合先进的工程技术手段和其他学科的科学原理，按照预先的设计，改造生物体或加工生物原料，为人类生产出所需的产品或达到某种目的。 中药生物技术的含义 是以现代生命科学为基础，结合先进的工程技术手段和其他学科的科学原理，针对中药和天然药物及其活性成分研究、开发和生产中存在的具体问题，按照预先的设计，进行生物体改造或生物原料加工，使其符合中药现代化和产业化的一门科学技术。 利用生物技术的基本研究思路和方法研究中药和天然药物及其活性成分。 中药生物技术的主要内容 基因工程 发酵工程 细胞工程 蛋白质工程与酶工程 抗体工程和组织工程 中药生物技术发展概况 一、生物技术在高质量中药原料的研究和生产以及中药材资源的可持续利用中有巨大的应用潜力 　　1.中药基因研究是中药资源保护、种植和可持续利用的重要手段 　　　　建立珍稀濒危中药材的基因库；高抗性的转基因药用植物；选育优良品种；道地性药材遗传特征分析 　2.细胞工程技术为中药和天然药物人工资源的开发提供了有效途径 　　　药物植物的快速繁殖、脱病毒 　　　大规模培养技术 　　　克隆技术，虎、穿山甲等 　3.发酵工程技术为现代中药的生产提供了重要手段 　　冬虫夏草菌发酵生产的菌丝体及产物 　　紫杉醇：生物合成和生物转化技术 4.蛋白质工程和酶工程为中药和天然药物活性成分生产提供了最佳技术手段之一 　　人参皂苷的转化 二、生物技术为提高中药和天然药物品质评价水平提供了新的实验方法 　　基因鉴别技术为中药材品种鉴定提供了新手段 三、生物技术为中药和天然药物新药研究与开发提供了新的工具和途径 1.生物芯片 2.生物转化和生物组合化学 分子生物学基础知识 分子生物学是对生物大分子进行结构和功能研究的一门科学。 主要是核酸生物学 DNA的结构 一级结构 二级结构 三级结构 DNA的功能 RNA的功能　 rRNA 　　是构成核糖体的骨架 tRNA 　　转动氨基酸 mRNA 　　蛋白质合成的模板 　　种类非常多，每一种的含量非常低 　　3’端有poly(A)尾巴，5’端有m7G帽子 DNA的生物学特性 　　变性 　　复性 DNA分子的变性 1.操纵子结构; 2.蛋白质基因单拷贝; 3.RNA基因多拷贝; 4.结构基因是连续的,没内含子; 5.大部分DNA用于编码蛋白质; 6.重复序列少. 植物细胞中DNA的提取 一般步骤： 　　（一）材料的预处理 　　（二）提取 　　（三）杂质的去除 提取 1.CTAB法原理 　　可破坏细胞膜使DNA释放到缓冲液中； 　　可保护DNA免受内源性核酸酶的降解；　 　　可与核酸形成复合物，在高盐溶液中可溶并且很稳定，降低盐的浓度可使之沉淀出来； 　　用乙醇可将复合物分离开来，核酸沉淀下来，CTAB溶于乙醇中。 CTAB法提取步骤 　　　加入10%CTAB提取液进行提取 　　　　　离心分离复合物沉淀 　　　　　　溶于高盐溶液中 　　　　　　乙醇沉淀DNA 基因工程：指在体外将核酸分子插入病毒、质粒或其他载体分子，构成遗传物质的新组合，并使之参入到原先没有这类分子的宿主细胞内，能持续稳定地繁殖和表达外源DNA。 基因工程的主要内容和步骤 获得目的基因；（切） 构建重组DNA分子；（接） 转化重组DNA分子；（转） 扩增重组DNA分子；（增） 筛选阳性重组克隆；（筛） 提取扩增的目的基因； 构建重组表达载体，转入宿主细胞，实现目的多肽或蛋白的表达。 基因工程常用工具酶 限制性内切酶（切）； DNA连接酶（接）； DNA聚合酶 限制性内切酶 是一类能识别和切割双链DNA分子中特定碱基序列的核酸水解酶。 通过切割DNA分子，对含有特定基因的片段进行分离、分析。 常用的限制性内切酶为Ⅱ型限制性内切酶。 DNA连接酶 用于将两段乃至数段DNA拼接起来的酶称为DNA连接酶。 它能催化5’磷酸基与3’羟基之间形成磷酸二酯键。 T4DNA连接酶：来自T4噬菌体，作用底物必须是双链DNA，既可连接匹配的粘性末端，也可连接平末端，最常用。 DNA聚合酶 以DNA或RNA为模板，催化dNTP连续加到双链DNA引物链3’-OH末端，合成与模板互补的DNA。 Taq DNA聚合酶：DNA测序和PCR反应 大肠杆菌DNA聚合酶（全酶）Ⅰ及其大片段（Klenow片段） 基因克隆载体 基因克隆载体：指在特定系统中能自我复制的DNA分子。 所分离的外源DNA一般并不带有复制控制系统及在新的受体细胞中实现功能表达所需的调控系统。 克隆载体：以繁殖DNA片断为目的的载体 表达载体：用来将克隆的外源基因在寄主