重组胰高血糖素样肽1载体的构建及其在枯草芽孢杆菌中-江苏大学.PDFVIP

第卷第期 江苏大学学报（医学版） ２９ ３ Ｖｏｌ．２９ Ｎｏ．３ 　 年月 　 Ｍａｙ２０１９ ２０１９ ５ （ ） Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｊｉａｎｇｓｕ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ Ｅｄｉｔｉｏｎ 　 　 　 　 　 　 重组胰高血糖素样肽载体的构建及其 １ 在枯草芽孢杆菌中的表达 １ １ １ １ １ １ 袁婧，郭畅，李昊翔，徐梦娇，丁艺，赵丽， 赵志聪１ １ １ ２ １ ，张安驰，周天然，屠志刚，袁国跃 （ 江苏大学附属医院内分泌代谢科，江苏镇江 ； 江苏大学生命科学院，江苏镇江 ） １． ２１２００１ ２． ２１２０１３ ［摘要］ 目的：构建及鉴定携带 标签的重组胰高血糖素样肽（ ， ）表达 　 Ｈｉｓ １ ｍｏｄｉｆｉｅｄ ｇｌｕｃａｇｏｎｌｉｋｅ ｐｅｐｔｉｄｅ１ ｍＧＬＰ１ 载体，实现其在枯草芽孢杆菌 中的分泌表达。 经化学合成得到含有 标签及 酶 ＷＢ８００Ｎ 方法： Ｈｉｓ ＢａｍＨ ／ Ｘｂａ Ⅰ Ⅰ 切位点的 基因片段，将其酶切后插入含信号肽 序列的大肠埃希菌枯草芽孢杆菌双穿梭载体 ｍＧＬＰ１ ａｍｙＱ ｐＨＴ４３ ｐＨＴ４３ｍＧＬＰ１ ｐＨＴ４３ｍＧＬＰ１ ＷＢ８００Ｎ 中，得到重组载体 ；通过电转化方法将质粒 转化到枯草芽孢杆菌 中，构建 ＷＢ８００Ｎ／ ｐＨＴ４３ｍＧＬＰ１ ＰＣＲ 含有目的基因的重组菌株 ，利用聚合酶链式反应（ ）、碱基