细胞色素b5glu44glu56的定点突变和蛋白质结构比较.pdf

高 等 学 校 化 学 学 报 年 月 ’ 、 细胞色素 , 一 一 的定 点突变和蛋 白质 结构 比较 孙 雨 龙 王 韵 华 周 刚 黄仲 贤 谢 毅 吴 小 丹 复旦 大学 化学 系 , 上 海 , 复旦 大学遗 传研 究所 摘要 用 寡聚 核昔 酸定 点突变 的方法 将 牛肝 细 胞色 素 、 基 因 编码 亲 水 结构 域 个 残 基 上 第 、 位和 位谷 氨酸 的密码子 变 成丙氨酸 的密码子 , 获得 突变体 和 的基 因 将 它 们分别 克 隆于 上 , 转 化大肠 杆菌 后 , 突变基 因得 到 成 功 的表达 , , 、 将含 细胞 色 素 。 及其 突变体基 因 的大肠 杆菌 发酵 酶法 裂解细 菌 依 次用 硫酸按 沉淀法 离子 交 、 、 、 换柱层析 凝胶柱 层 析进行分离纯化蛋 白 用 一 法 紫外可见 光谱 圆二 色谱研 究蛋 白质 , 发现定点突变细胞色素 表面 上这 个氨 基 酸残 基对 蛋 白质 的局 部二 级结构无 明显 影 响 关键 词 细 胞色素 , 定 点突变 , 蛋 白质结构 细胞色 素 是 一种低分 子 量 的膜蛋 白, 由大约 个 氨基 酸残基 组成 , 它在 高等动物肝 、 细胞 内质 网 中有 较 高 的分 布 , 参 与生物 体 内一 系列 氧化 还 原反 应 , 如脂 肪 酸 去 饱 和 川 细 胞 色 素 还 原川和 高铁血 红 蛋 白还 原 等 细胞色 素 由 个 结构 域组 成 , 一个 是将 细 胞色 素 反应 中心 固定在 膜 上 的肤链