新生大鼠海马神经元的体外原代培养.pdfVIP

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2019-08-20 发布于未知
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新生大鼠海马神经元的体外原代培养.pdf

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2007年3月基础医学与临床 March2007 第27卷第3期 BasicClinicalMedicine V01．27No．3 文章编号：1001—6325(2007)03—0329—04 技术与方法新生大鼠海马神经元的体外原代培养赵秀鹤1，迟兆富h，尚伟2，迟令懿1 (山东大学1．齐鲁医院神经内科；2．第二医院神经内科，山东济南250012) 摘要：目的研究体外原代培养新生大鼠海马神经元的方法，并观察其发育分化过程中形态学的变化。方法取出生24h内的wistar大鼠分离海马，消化后差速贴壁，种植在涂有多聚-L一赖氨酸的盖玻片上，于不同时间在倒置相差显微镜下观察形态变化；采用NsE免疫细胞化学技术鉴定神经元。结果神经元12～24h后大部分贴壁，随时间延长形态多变，突起逐渐增多，神经元突起间互相接触形成网络。培养第7—10天时细胞最为丰满，至28天时培养液中有悬浮的细胞碎片。NsE鉴定结果显示神经元纯度为(92．3±6．8)％。结论该方法简单易行，神经元纯度较高，可作为神经元体外培养的良好模型用于以后的研究。关键词：海马；神经元；细胞培养；大鼠中图分类号：R741．02文献标识码：A cultureof neuronsofnew-bomrats Primary hippocampal ZHAO Xiu．hel，CHIZhao．fuh，SHANGWei2，CHI Ling—yil 0f of second (1．DepanmentNeurology，QiluHospital，sh蚰dongunive玛ity；2．Dep呲mentNeumlogy，theHospital， shandongUniversicy，JinaIl250012，China) 一 Tbestablisha culturemethodof neuronsofnew-bom toob- Abstract：objectiVeprimary hippoc砌pal rats，and servethe characteristicsatdifferent anddifbrentialMethodsThe mo印hological deVelopmental stages． was andthecellswereseededina nask．Theneuronswerethentransf色ITedandre-seededoncover pus digested coatedwith Theneuronswereidenti6ed neuron eno一 91asses poly—L一1ysine． bypolyclonaLlantibodyagainst speci6c wasobservedunder A numberof 1ase(NSE)．The morpholog)r phase-contrastmicmscope．R鹤llltslarge hipp— neuronstoadheretothecover after12～24 showeddi￡fbrent oc锄pal began glasses hour