细胞核与染色质--学生打印版.pptVIP

细胞核与染色质 王飞 fei@jlu.edu.cn 内容提要 细胞核基本结构 核被膜 核基质 染色质 核仁 核体 核被膜的结构组成 核被膜 (nuclear envelope) 核膜(nuclear membrane) 外核膜 核糖体颗粒 与内质网相连 内核膜 无核糖体颗粒 LBR 核周间隙 与内质网腔相通 核孔 内外膜融合 孔膜区 核孔复合体(NPC) 孔膜区域组装的复杂蛋白复合物 核质物质运输 核纤层(nuclear lamina) 核纤层蛋白(lamin A-C) 纤维状网络结构 结构支撑 调节基因表达 调节DNA损伤修复 核基质 核骨架 蛋白质纤维网架结构体系 真核生物细胞核起源于原核细胞入侵？融合？ 染色质 核仁 核仁：染色体的核仁组织区 RNA 蛋白 核糖体工厂 核体 核内分子生物学过程 染色质结构调节 DNA复制、修复、重组 基因转录及其调控 RNA 加工 短片：chromosome coil 短片：DNA replication 短片：strand exchange 短片：gene transcription 核孔复合体-核质转运通道 跨内外核膜 亲水通道 核孔直径 80-120nm 复合体直径120-150nm 自由扩散 顺浓度梯度 有效直径 9-10nm 40-60KD 无需能量 主动运输 信号肽 需能量 不去折叠 双向同时运输 转运速度极快（~500个/s） 短片：Rapid nuclear importation 核孔复合体的结构 30余种蛋白亚基 多拷贝组合 八边形对称结构 核孔复合体的结构 核孔复合体转运的分子尺寸限制 无定形结构域(unstructured region) 无序屏障 主动运输与信号肽 蛋白分选：信号肽 核转运信号(NTS) 核分选：核定位信号(NLS) 核输出信号(NES) 任何位置 完成分选后不剪切 核孔复合体转运的生物大分子 NTS/向导蛋白 转入(Import) 组蛋白 DNA聚合酶 RNA聚合酶 RNA加工相关蛋白 转出(Export) tRNA mRNA 核糖体前体颗粒 转入转出 基因转录调控蛋白（转录因子） RNA向导蛋白 主动运输模型 通道：NPC 出入口：蛋白纤维 搬运工：核转运受体 (nuclear transport receptor) 辅助：FG-repeats Ran GTP 核转运受体对靶蛋白的识别 直接结合：多种NTR 识别不同NTS 间接结合：适配蛋白(adaptor protein) GTPase：Ran 导航： 控制转运方向 调控因子： Ran-GAP Ran-GEF Ran控制的NTR分子开关 NPC主动运输的分子模型 RNA的出核转运 向导分子：具有NES的辅助蛋白 质量检查：正确折叠和加工的RNA分子才能 获得出核资格 核膜的崩解与组装-骨架章交叉 发生于细胞分裂过程中 触发点：磷酸化 p34cdc2 N端Ser22 C端Ser392 Lamin A 单体形式游离 Lamin B 与核膜小泡结合 核膜的崩解与组装 核膜的崩解与组装 找到染色体 前期核膜崩解后 游离于胞质内： 核膜小泡(双层核膜+膜蛋白) NPC亚基蛋白+NIR FG repeats Lamin Ran Ran-GAP 末期染色体上： Ran-GEF → Ran-GTP Cloud Lamin去磷酸化启动核膜重组： 核膜小泡→ Lamin ← NPC蛋白+NIR NPC+NIR → Ran-GTP Cloud 核蛋白回归及非核蛋白屏蔽 NPC 组装完毕即开始工作：入核转运 NLS不剪切的生理意义：反复利用 核膜组装紧贴染色体：屏蔽非核蛋白 核仁- Ribosome-producing factory Unlike many of the major organelles in the cell, the nucleolus is not bound by a membrane, it is a large aggregate of macromolecules. 染色质（rRNA genes） 前体rRNA 成熟rRNA rRNA加工酶 向导RNA（snoRNP） 核糖体蛋白 核糖体亚单位前体颗粒 核骨架 染色质的核