LC-MS在药物代谢动力学中的应用.pptVIP

LC-MS在药物代谢动力学中的应用 要点：(删除4-6片) 体内药物分析中的现代分析方法与技术(标题一致性) 一、气相色谱-质谱联用技术（GC-MS) *二、液相色谱-质谱联用技术(LC-MS) *三、液相色谱-核磁共振联用技术(LC-NMR) 四、毛细管电泳免疫分析(CEIA) 五、柱切换高效液相色谱法 六、高效毛细管电泳法(HPCE) 气相色谱-质谱联用技术（GC-MS） 特点： 灵敏度高、分析速度快、鉴别能力强； 但它受到药物分子的极性和热稳定性等限制，要求分子具有挥发性或通过衍生化提高分子的挥发性，因此其有明显的局限性。 液相色谱-核磁共振联用技术(LC-NMR) 特点： 能提供最大量的分子结构信息，在体内药物分析中对代谢产物的鉴定具有显著优势，但是在做NMR分析前必须做大量的分离纯化工作，不利于样品的快速分离；另外，NMR检测灵敏度低是LC-NMR技术的瓶颈。 液相色谱-质谱联用技术(LC-MS) 基本组成： HPLC装置、接口装置与离子源、质量分析器。 液相色谱-质谱联用技术(LC-MS） 特点： 样品前处理简单，无需衍生化，适用范围广 将色谱的高分离能力与质谱的高检测灵敏度、定性专属性集于一身 随着接口装置和离子化技术的发展成熟，该技术在体内药物分析中逐渐发展成为一种常规的分离检测方法 LC-MS在药物动力学中的应用介绍 药物动力学研究，需对生物样品中的微量乃至痕量成分定量分析。而当今的药物研制日趋低剂量，使常规的分离检测技术难以满足复杂介质中痕量成分准确定量的要求。LC-MS技术的高灵敏度使之在这一 领域的应用日趋广泛并趋于常规化。 举例： 闫小华 等人用 L C/ MS 联用法测定人血浆中氟西汀的浓度 ： 色谱条件 色谱柱：C18（250mm*4.6mm,5μm) 柱温： 30℃ 流动相：10mmol/L醋酸铵缓冲液-甲醇 （20：80） 流速：1.0ml/min 质谱条件 离子检测方式：选择性离子检测； 离子极性：正离子 离子化方式：气动辅助电喷雾离子化 检测对象：苯磺酸氨氯地平 传输区电压：100V 干燥气流速：10L/min 雾化室压力：40psi 干燥气温度：350℃ LC-MS在代谢物研究中的应用 在新药开发过程中，为了预防潜在的毒性，测定是否有代谢物和已知药物相关，是否和原药具有相同的治疗作用或对其他治疗有内在的活性，有必要对代谢物进行结构鉴定。 举例： 陈怀侠等人运用液相色谱-电喷雾离子阱串联质谱(LC-MSn )联用技术研究了樟柳碱大鼠肝匀浆中的代谢物： 色谱条件： 色谱柱：C18柱(150 mm ×2 mm i. d. , 5μm) , 流动相：甲醇/0. 01%三乙胺溶液(用甲酸 调节pH 3. 5) (60∶40, V /V ) 柱温：40 ℃ 流速：0. 2 mL /min。 质谱条件： 采用电喷雾离子化方式,检测离子为正离子。离子源喷射电压5. 0 kV,毛细管电压45 V,毛细管温度200℃,氮气为鞘气,其流速40个单位,其它通过碰撞诱导解离获得母分子离子的多级质谱, 优化的多级质谱相对碰撞能量为30%。采用全扫描一级质谱及其源内碰撞诱导解离 、全扫描二级质谱及三级质谱等方式进行测定。 LC-MS在高通量筛选中的应用 随着组合化学和高通量活性筛选技术的发展，大量的活性化合物被发现，这就对这些活性化合物的药代属性进行筛选提出要求。为解决体内外药代动力学筛选规模小及化合物相互影响的问题,国外实验室开发了快速的药代动力学筛选法,将样品收集周期短至6～8 h ,利用串联LC-MS-MS 技术,计算AUC0～ t 。利用体外肝细胞培养和串联LC/MS可识别代谢产物 。 LC-MS在中药现代化中的应用 液相色谱-质谱联用技术自身的优点也决定了其在中药药动学方面将发挥不可替代的作用，对阐明和揭示中草药作用机制及其科学内涵，设计及优选给药方案，促进中药新药开发和剂型改进及提高质量水平，推动中医药走向世界，并最终实现中药现代化具有重要意义。 * * * * * * 一、几种现代分析方法介绍与比较 二、LC-MS在药物动力学中的应用 三、LC-MS在代谢物研究中的应用 四、LC-MS在现代新药研究中的应用 1、高通量筛选 2、中药现代化 目前商品化LC-MS仪主要用大气压离子化接口（API）。API不仅是一种较好的接口技术，同时也是一种离子化方法，该技术使样品的离子化在处于大气压条件下的离子化室中完成。 API的操作模式分三种： 一、电喷雾离