酵母表面展示多肽片段分析驻42PD1的免疫原性-中国免疫学杂志.pdf

程摇 林等摇 酵母表面展示多肽片段分析驻42PD1的免疫原性摇 第9期 ·1333 · doi:10.3969/ j.issn.1000鄄484X.2016.09.019 酵母表面展示多肽片段分析驻42PD1 的免疫原性淤 程摇 林摇 王子乔摇 徐六妹摇 唐摇 娴摇 周摇 泱摇 王摇 辉摇 (深圳市第三人民医院,深圳 518112) 摇 摇 中图分类号摇 R392郾11摇 摇 文献标志码摇 A摇 摇 文章编号摇 1000鄄484X(2016)09鄄1333鄄05 [摘摇 要]摇 目的:分析驻42PD1胞外区的免疫原性。 方法:将驻42PD1胞外区编码基因分为6个片段,分别用PCR 的方 法进行扩增,并克隆至酵母表面展示质粒pCTCON2。 分别将重组酵母表达质粒转化酵母细胞,涂布SDCAA平板,挑取单细胞 克隆于SGCAA培养基中诱导目的基因的表达。 通过肌肉注射 驻42PD1真核表达质粒加局部电穿孔的方法免疫 BALB/ c小 鼠,制备鼠抗人驻42PD1免疫血清。 用流式细胞术的方法分析免疫血清与酵母表面展示的驻42PD1多肽片段的结合。 结果: PCR扩增的驻42PD1的6个片段的编码序列全长均110 bp,核酸序列分析显示克隆的