第三代慢病毒高效率包装系统的建立_张磊.pdfVIP

基因组学与应用生物学，2009 年，第28 卷，第2 期，第326-330 页 Genomics and Applied Biology, 2009, Vol.28, No.2, 326-330 实验技术与方法 Techniques and Methodology 第三代慢病毒高效率包装系统的建立 * * ** 张磊 刘庆友 胡天 张晓溪 崔奎青 陆凤花 石德顺 广西大学动物繁殖研究所, 南宁, 530005 * 同等贡献作者 ** 通讯作者, ardsshi@ 摘 要 慢病毒介导法是最有前途的转基因动物生产方法之一，高滴度慢病毒颗粒的包装是慢病毒转基因 动物技术的关键。本研究应用含有增强型绿色荧光蛋白基因(eGFP)的第3 代慢病毒载体系统，用脂质体转染 法将慢病毒系统4 质粒共转染293T 包装细胞，培养48~72 h 收集病毒上清液，通过超速离心进行浓缩，采用 批量快速测定法(LaSRT)测定病毒滴度。结果显示，用脂质体转染法包装的慢病毒能成功地感染293T 细胞， 8 经检测病毒滴度达到5×10 IU/mL 以上，初步建成了高滴度慢病毒包装平台，为慢病毒介导制作转基因动物