基因工程常用工具及应用.pptVIP

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  • 2019-09-03 发布于江苏
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第四章 基因工程的工具酶 及其应用 第一节  限制性核酸内切酶 限制性核酸内切酶 (restriction endonuclease,RE) 是由细菌自己产生的一种能识别双链 DNA中的特定序列,并以内切方式水解核酸中磷酸二酯键的核酸内切酶。 在细菌体内,这种内切酶可以分解外源性的DNA物质,例如病毒等;而细菌本身的DNA同一识别序列中的某些碱基被甲基化所保护。这种细菌内部的限制与修饰作用分别由核酸内切酶和甲基化酶完成,构成了类似免疫的防御系统。 解释 何谓内切酶 -o-o-o-o-o-o-o-o-o-o-o-o-o-o- 红色为外切酶的作用位点, 蓝色为内切酶的作用位点 限制性核酸内切酶的分类 目前已发现的限制性核酸内切酶600余种,可分为三大类。 Ⅱ类限制性核酸内切酶广泛用于基因工程; 特点:识别切割位点比较专一,只有切割作用。无甲基化修饰作用。 Ⅰ类和Ⅲ类限制性核酸内切酶同时具有内切活性和甲基化修饰活性,且识别位点复杂,特异性差,不适用于基因工程。 一.限制性内切酶的命名 Hind Ⅲ H in d Ⅲ EcoRI E co R I 二. II型限制酶的识别特

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