国家自然科学基金的选题 (2).pptVIP

小结 将已有的科研基础做成图，从中去在寻找可能的切入点。 研究一定要Forward。 （正常组，糖尿病组） 首先提取糖尿病大鼠肾小管上皮细胞及高糖刺激下大鼠肾小管上皮细胞内miRNA，进行基因芯片分析，对照正常大鼠及正常培养基培养大鼠肾小管上皮细胞，确定上调和下调的miRNA 利用生物分析软件Targetscan预测可能与大鼠SREBP-1结合的miRNA 结合基因芯片和软件分析的结果确定可能参与调节糖尿病肾小管上皮细胞SREBP-1表达的待选microRNA。 后续相关实验 采用荧光实时定量 PCR 技术（Real-time PCR）验证待选的SREBP-1调控相关的 microRNA。 表达调控实验 双荧光素酶实验 突变实验 功能实验 2012 microRNA在调控糖尿病肾小管上皮细胞脂质沉积中的作用研究 申报项目 失败 项目设计过大，目标不明确 基础差 SH2结构含磷酸肌醇（SH2 domain-containing inositol 5’-phosphatase, SHIP） C末端调节蛋白（carboxyl-terminal modulator protein ，CTMP） 2013 PTEN、SHIP和CTMP对糖尿病肾病的作用及机制研究 申报项目 本研究需要掌握的实验技能 细胞培养 动物饲养 免疫组织化学及免疫荧光 Western blot Real-time PCR ELISA 质粒构建及转染 其他技能 数据分析 统计分析 图表制作 论文撰写 总结 基础 创新（Forward） 谢谢 * 国家自然科学基金申报体会 郝军 河北医科大学 病理学教研室 2007 固醇调节元件结合蛋白(SREBPs)对糖尿病肾病中脂质沉积的调节及药物逆转 2009 高脂喂养对大鼠肾小管上皮细胞SREBP-1、TGF-b1表达和细胞外基质沉积的影响 2010 高脂饮食对大鼠肾小管上皮细胞脂质代谢和细胞外基质沉积的影响 2011 PI3K/Akt通路和SREBP-1联合调控对糖尿病肾小管上皮细胞脂质沉积影响的研究 2012 microRNA在调控糖尿病肾小管上皮细胞脂质沉积中的作用研究 2013 PTEN、SHIP和CTMP对糖尿病肾病的作用及机制研究 课题的构思（idea）创新性 原始创新性：是指前所未有的重大科学发现、技术发明、原理性主导技术等创新成果。 二级创新 糖尿病肾病 肾小球 肾小管 肾小球 足细胞 内皮细胞 系膜细胞 肾小管 SREBP-1基因在糖尿病肾小球系膜细胞中表达与细胞脂质沉积有关（文献） SREBP-1基因在肾小管上皮细胞中表达与细胞脂质沉积有关吗？ 申报项目 2007 固醇调节元件结合蛋白(SREBPs)对糖尿病肾病中脂质沉积的调节及药物逆转 结果 基础差（paper 0） 糖尿病中，高糖通过刺激肾小管上皮细胞引起固醇调节元件结合蛋白-1（Sterol Regulatory Element Binding Protein-1, SREBP-1）升高，引起脂肪酸合成酶（Fatty Acid synthase, FAS）升高，导致细胞内脂滴增多。 发表论文 SCI 1篇 中文核心 2篇 2009 高脂喂养对大鼠肾小管上皮细胞SREBP-1、TGF-b1表达和细胞外基质沉积的影响 2010 高脂饮食对大鼠肾小管上皮细胞脂质代谢和细胞外基质沉积的影响 申报项目 结果 创新性差 对于高脂饮食的动物模型构建，没有基础 下一步如何做 SREBP-1基因在肝炎中受PI3K/Akt信号通路的正向调控（文献） SREBP-1基因对肾小管上皮细胞脂质沉积的影响，是否也受PI3K/Akt信号通路的调控？ 糖尿病，高糖通过激活肾小管上皮细胞PI3K/Akt通路，引起SREBP-1升高，导致细胞内脂质沉积及细胞外基质增多 PTEN可通过抑制Akt的激活，避免高糖引起的细胞内脂质沉积及细胞外基质增多 发表的论文 SCI 4篇 中华 2篇 核心和 CSCD 9篇 细胞坏死 申报项目 2011 PI3K/Akt通路和SREBP-1联合调控对糖尿病肾小管上皮细胞脂质沉积影响的研究 *