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* 1.利用乳腺生物反应器能够获得一些重要的医药产品,如人的血清白蛋白,这是因为将人的血清白蛋白基因导入了动物的乳腺细胞中( ) 2.应用DNA探针技术,可以检测转基因抗冻番茄植株中目的基因的存在及其完全表达( ) 3.E·coliDNA连接酶既可连接平末端,又可连接黏性末端( ) 4.基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等( ) 5.目的基因导入植物细胞常用农杆菌转化法;导入动物细胞常用显微注射技术,导入微生物细胞常用感受态细胞法( ) 阶段排查 回扣落实(九) × × × √ √ [基础·需自查] 6.愈伤组织是外植体通过脱分化和再分化后形成的( ) 7.利用物理法或化学法,可以直接将两个植物细胞进行诱导融合( ) 8.B淋巴细胞和骨髓瘤细胞经细胞融合后有三种细胞类型(若仅考虑两两融合的情况)( ) 9.植物组织培养的过程主要包括脱分化和再分化两个阶段,脱分化的结果是形成愈伤组织,再分化的结果是形成根和芽( ) 10.从卵巢中采集的卵母细胞可直接与获能的精子进行体外受精( ) 11.成熟的精子并不具有受精能力,必须获能后才具备受精能力( ) 12.转入油菜的抗除草剂基因,可能通过花粉传入环境中( ) × × √ √ × √ √ 13.目前对转基因生物安全性的争论主要集中在食用安全性和环境安全性上( ) 14.胚胎干细胞在体外培养条件下具有增殖而不发生分化的特点( ) 15.在对囊胚进行分割时,要将滋养层细胞均等分割( ) 16.在胚胎移植中,对供体母畜要做超数排卵处理,对供、受体要做同期发情处理( ) 17.胚胎移植的基本程序:对供、受体的选择和处理→配种或进行人工授精→对胚胎的收集、检查、培养或保存→胚胎移植→移植后检查( ) 18.“无废弃物农业”遵循的是物种多样性原理( ) 19.在建设高新农业时,沼气池的建立遵循的是物质循环再生原理( ) √ √ × √ √ × √ [重点·再强化] 1.基因工程重点回眸 (1)基因工程常考的3种基本工具 限制性核酸内切酶、DNA连接酶和载体。 (2)基因表达载体的组成 目的基因+启动子+终止子+标记基因等。 (3)基因工程的四大操作程序 ①目的基因的获取(三大方法) a.从基因文库中获取。 b.利用PCR技术扩增:其实质是在体外对目的基因进行大量复制。 c.用化学方法人工合成。 ②基因表达载体的构建(此为“核心步骤”) ③将目的基因导入受体细胞(“三大方法”) a.导入植物细胞——农杆菌转化法(花粉管通道法、基因枪法)。 b.导入动物细胞——显微注射法(导入受精卵)。 c.导入微生物细胞——使用Ca2+处理细胞。 ④目的基因的检测与鉴定 DNA分子杂交 分子杂交 抗原-抗体杂交 抗性实验 是否出现了杂交带 抗性是否存在 2.细胞工程重点再现 (1)植物体细胞杂交的关键 ①酶解法——用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁。 ②促融剂——聚乙二醇。 ③杂种细胞的形成标志——新细胞壁的形成。 ④培养杂种植株的技术——植物组织培养。 ⑤培养成功的原理——细胞全能性。 (2)动物细胞培养的特殊条件 ①胰蛋白酶的两次使用:首先用胰蛋白酶处理动物的器官或组织,以制备单细胞悬液;培养过程中发生接触抑制时,同样要用胰蛋白酶使细胞分散开。 ②避免杂菌污染的措施:培养液及培养用具灭菌处理,加入一定量的抗生素,定期更换培养液。 3.胚胎工程再强化 (1)胚胎的早期培养的培养液与动物细胞培养液成分的区别 项目 动物胚胎培养液 动物细胞培养液 盐类 无机盐、有机盐 无机盐、微量元素 营养物质 氨基酸、核苷酸 糖、氨基酸 调节物质 维生素、激素 促生长因子 特有成分 血清 血清、血浆 胚胎的早期培养与动物细胞培养所用的培养液类似,但是二者所依据的原理和培养目的不同。 (2)必须关注的几个易错点: ①区别受精的标志及可移植时期 a.受精的标志:在卵细胞膜和透明带的间隙看到两个极体。 b.可以移植或分割的阶段:桑椹胚和囊胚。 ②胚胎移植过程中的不同 a.两次使用激素:第一次对供、受体进行同期发情处理;第二次用于供体的超数排卵。 b.两次检查:第一次对收集的胚胎进行检查;第二次对受体是否妊娠进行检查。 ③同期发情处理与超数排卵 胚胎工程流程图中的同期发情对象为同种供体母畜和受体母畜,超数排卵对象为供体母畜。 *
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