高考生物一轮复习 第十单元 现代生物科技专题 第35讲 基因工程备考一体名师课件 苏教版.ppt

10.绿色荧光蛋白(GFP)能在蓝光或紫外光的激发下发出荧光，这样借助GFP发出的荧光就可以跟踪蛋白质在细胞内部的移动情况，帮助推断蛋白质的功能。下图为我国首例绿色荧光蛋白(GFP)转基因克隆猪的培育过程示意图，据图回答下列问题： 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 (1)图中通过过程①②形成重组质粒，需要限制性核酸内切酶切取目的基因、切割质粒。限制性核酸内切酶Ⅰ的识别序列和切点是－G↓GATCC－，限制性核酸内切酶Ⅱ的识别序列和切点是－↓GATC－。在质粒上有酶Ⅰ的一个切点，在目的基因的两侧各有1个酶Ⅱ的切点。 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 a.请画出质粒被限制性核酸内切酶Ⅰ切割后形成黏性末端的过程。 答案 答案　如图所示 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 解析 解析　相对比较简单，书写要关注DNA序列与限制性核酸内切酶识别序列的区别，不要遗漏了酶和黏性末端的正确表达。 b.在DNA连接酶的作用下，上述两种不同限制性核酸内切酶切割后形成的黏性末端能否连接起来？_________，理由是______________________ ________________________________________________。 答案 可以连接　 由两种不同限制性核酸内切酶切割后形成的黏性末端是相同的(或是可以互补的) 解析 解析　由于两种限制性核酸内切酶切割形成的黏性末端是相同的，可以互补配对，因此可用DNA连接酶进行相互“缝合”。 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 (2)过程③将重组质粒导入猪胎儿成纤维细胞时，采用最多也最有效的方法是____________。 答案 解析 解析　基因工程中目的基因导入动物细胞的方法是显微注射法。 显微注射法 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 答案 解析 (3)如果将切取的GFP基因与抑制小猪抗原表达的基因一起构建到载体上，GFP基因可以作为基因表达载体上的标记基因，其作用是_____________ ____________________。 鉴定受体细胞中是否含有目的基因 解析　基因表达载体上标记基因的作用是鉴定受体细胞中是否含有目的基因；获得转基因猪，可以解决医学上供体器官不足和免疫排斥问题。 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 (4)目前科学家们通过蛋白质工程制造出了蓝色荧光蛋白、黄色荧光蛋白等，采用蛋白质工程技术制造出蓝色荧光蛋白过程的正确顺序是__________(用序号表示)。 ①推测蓝色荧光蛋白的氨基酸序列和基因的脱氧核苷酸序列 ②蓝色荧光蛋白的功能分析和结构设计 ③蓝色荧光蛋白基因的修饰(合成) ④表达出蓝色荧光蛋白 答案 解析 解析　蛋白质工程操作流程的正确顺序是②①③④。 ②①③④ 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 * * * * * (3)若要使目的基因在受体细胞中表达，需要通过质粒载体而不能直接将目的基因导入受体细胞，原因是_____________________________________ ___________________________________________________________ (答出两点即可)。 1 2 3 4 质粒载体中有启动子、终止子，便于目的基因的表达；质粒中有标记基因便于筛选；质粒中含有复制原点等 答案 解析 解析　由于目的基因无复制原点，也无基因表达所需的启动子和终止子，所以需与质粒构建重组质粒后再导入受体细胞。 (4)当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是____________。 1 2 3 4 答案 解析 解析　DNA连接酶可以催化两个DNA片段的黏性末端或平口末端连接形成磷酸二酯键。 磷酸二酯键 (5)若获得的转基因植株(几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中)抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是__________ ______________________________________。 1 2 3 4