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细菌鉴定
一、标本的处理:
1、先按标准操作规程( SOP )对标本进行接种(一般种
普通血平板和选择性麦康凯平板;真菌 -沙保弱;链球菌 -巧克
力平板, CO2 温箱;结核菌 -罗氏 ;粪 -SS )。一般细菌置于
35 ℃培养 24h ;真菌置于 30 ℃培养
2 、后将标本涂片,进行革兰染色,判断是革兰阴性或阳
性,杆状,球状,短杆,球杆及弧状。
二、根据菌落形态,颜色,光滑与否,边缘,大小,是否有溶
血环等初步判断所属菌属。
三、生化鉴定(最主要的依据)
定向实验 (最重要两实验 )
API 微生物鉴定系统
生理生化鉴定:根据微生物对各种生理条件(温度、 pH 、
氧气、渗透压)、生化指标(唯一碳氮源、抗生素、酶、盐碱
性)代谢反应进行分析,并将结果转化成软件可以识别的数据,
进行聚类分析,与已知的参比菌株数据库进行比较,最终对未
知菌进行鉴定的一种技术。
生物梅里埃 API 试剂类型
? API 20E 革兰氏阴性杆菌鉴定
? API 20NE 非发酵菌鉴定
? API STAPH 葡萄球菌及微球菌 常用 5 种
? API STREP 链球菌鉴定
? API CORYNE 棒状杆菌
? API 20C AUX 酵母菌
? API 20A 厌氧菌
? API LISTERIA 李斯特菌
? API CAMPY 弯曲菌属
? API CH 芽胞杆菌 /乳酸杆菌
三、药敏试验(辅助鉴定及指导临床用药)
最常用的纸片扩散法即 K-B 法。
原理: 该法是将含有定量抗菌药物的滤纸片贴在已接种了测试
菌的琼脂表面上,纸片中的药物在琼脂中扩散,随着扩散距离的增
加,抗菌药物的浓度呈对数减少,从而在纸片的周围形成 浓度梯度 。
同时,纸片周围抑菌浓度范围内的菌株不能生长,二抑菌范围外的
菌株则可以生长,从而在纸片的周围形成透明的抑菌圈,不同的抑
菌药物的抑菌圈直径因受药物在琼脂中扩散速度的影响而可能不同,
抑菌圈的大小可以反映测试菌对药物的敏感程度,并与该药物对测
试菌的 MIC 呈负相关。
结果分为敏感 S 、耐药 R 及中介 I。
利用某些菌对某些药物天然耐药进而辅助鉴定结果正确与否 ,如
嗜麦芽窄食单胞菌对亚胺培南 (碳青霉烯类 )天然耐药。
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