发酵工程复习.docVIP

PAGE 发酵工程 周家浩 一、绪论 1、传统概念 发酵最初是来自于拉丁语“发泡”，是指酵母作用于果汁或发芽的谷物时产生二氧化碳的现象。 2、生化和生理学意义的发酵 指微生物在无氧条件下，分解各种有机物质产生能量的一种方式；或者更严格地说，发酵是以有机物作为电子受体的氧化还原产能反应。如葡萄糖在无氧条件下被微生物利用产生酒精并放出CO2。 3、工业上的发酵 泛指利用生物细胞制造某些产品或净化环境的过程。 4、发酵工程：是应用微生物学等相关的自然科学以及工程学原理，利用微生物等生物细胞进行酶促转化，将原料转化成产品或提供社会性服务的一门科学。 5、发酵工程基本组成部分 上游工程、发酵工程、下游工程。 6、发酵工程产业化的重要环节 三个环节：投产试验、规模化生产和市场营销。 7、发酵工业面临问题 ①菌种的纯种问题（遗传稳定性，安全，周期短、转化率高产率高，抗污染能力强：噬菌体、蛭弧菌）； ②合适的反应器（基生产规模化，原料利用量大，并且具有一定选择性，节能，结构多样化、操作制动化，节省劳力）； ③基质的选择（价廉，原料利用量大，并且具有一定选择性，易被利用，副产物少，满足工艺要求）。 8、我国发酵工业要走的产业路线 实施“三步走”战略，第一步为技术积累阶段（力争2010年前完成）；第二步为产业崛起阶段（力争2015年左右完成）；第三步为持续发展阶段（2020年左右完成）。 9、发酵工程的发展前景 ①基因工程的发展为发酵工程带来新的活力； ②新型发酵设备的研制为发酵工程提供先进工具； ③大型化、连续化、自动化控制技术的应用为发酵工程的发展拓展了新空间。； ④生态型发酵工业的兴起开拓了发酵的新领域。 二、微生物育种选育 1、菌种分离的一般过程 标本采集→预处理→富集培养→菌种分离（初筛、复筛）→发酵性能鉴定→菌种保藏。 菌种常规分离法：平板划线法、稀释分离法和涂布法。 生化反应分离法：透明圈法、变色圈法、抑菌圈法、生长圈法。 2、富集的目的：让目的微生物在种群中占优势，使筛选变得可能。 富集培养方法：（1）分批式富集培养；（2）恒化式富集培养。 3、自然选育：不经人工处理，利用微生物的自然突变进行菌种选育的过程称为自然选育。 4、自然选育在工艺生产中的意义：自然选育是一种简单易行的方法，可达到纯化菌种、防止菌种退化、稳定生产、提高产量的目的。虽然其突变率很低，但却是工厂保证稳产高产的重要措施。 5、诱变育种：人工利用各种诱变剂诱发基因突变，再通过适当的筛选方法获得所需要的优良菌种的育种方法，称为诱变育种。 6、诱变育种对出发菌株的要求 ★对菌株产量，形态、生理等情况了解； ★生长繁殖快，营养要求低，产孢子多且早； ★对诱变剂敏感； ★菌株要有一定的生产能力； ★多出发菌株：一般采用3~4个出发菌株，在逐代处理后，将产量高、特性好的菌株留作继续诱变的出发菌株。 7、诱变筛选流程 出发菌种→斜面→单孢子悬液→诱变处理→稀释涂平板→挑取单菌落200个→摇瓶初筛50株→挑出高产斜面→留种保藏菌种→传种斜面→摇瓶复筛5株→挑出高产菌株→放大罐试验→中试考查，大型投产试验。 8、工业上优良生产菌种应具备的基本特性 （1）菌种细胞的生长活力强； （2）生理性状稳定； （3）纯、具有抗噬菌体感染的能力； （4）稳定高产，与目标产品性质相近的副产物及其他产物少； （5）能采用价格便宜，来源广泛的原料，并且转化效率高。 9、种子接种量：指移入种子液的体积和接种后培养液体积之比。 10、种子种龄：指种子罐中培养的菌丝体开始移入下一级种子罐或发酵罐时的培养时间。 11、影响种子质量的因素 ①原材料质量； ②种龄； ③培养条件； ④斜面冷藏时间。 12、保证种子质量的控制措施 ①菌种的稳定性； ②提供种子培养的适宜环境； ③无杂菌侵入。 13、工业上接种的方法 火焰接种法、微孔法、压差法。 三、发酵工业培养基及原料处理 1、发酵培养基的要求 ①培养基能够满足产物最经济的合成； ②发酵后所形成的副产物尽可能的少； ③培养基的原料应因地制宜，价格低廉，且性能稳定，资源丰富，便于采购运输，适合大规模储藏，能保证生产上的供应； ④所选用的培养基应能满足总体工艺的要求，如不应该影响通气、提取、纯化及废物处理等。 2、常用的碳源：①糖类；②油脂；③有机酸；④正烷烃。 常用的糖类：①葡萄糖（速效碳源）；②糖蜜；③淀粉、糊精。 3、（1）生理酸性物质：无机氮源被菌体作为氮源利用后，培养液中就留下了酸性或碱性物质，这种经微生物生理作用（代谢）后能形成酸性物质的无机氮源叫生理酸性物质，如硫酸铵； （2）生理碱性物质：若菌体代谢后能产生碱性物质的则此种无机氮源称为生理碱性物质，如硝酸钠。 4、（1）无机氮源：铵盐、硝酸盐和氨水； （2）有机氮源：花生饼粉、黄豆饼粉、棉子饼粉、玉