第五章第三节——四层析1.pptVIP

（1）层析柱 层析柱是下端有细口并带有筛板的玻管。柱的直径与长度之比，一般为1∶10- 1∶40。采用极细吸附剂装柱时，宜用比例大的层析柱。反之，则宜用比例小的层析柱。这样有利于节省时间和提高分辨率。层析柱的床体积是由吸附剂的量和膨胀度决定的。 （2）吸附剂的用量 吸附剂的用量是根据其自身的操作容量和分离物中各成分的性质决定的。当操作容量高时， 吸附剂用量少。一般吸附剂的用量为被分离样品的30-50倍。若样品中各成分的性质相似难以分开时，则吸附剂用量应增大，有时大于样品的100倍 （3）装柱 装柱的方法分干装法和湿装法两种。湿装法系先加适量平衡液到柱内，排走其中的空气，然后把预先用平衡液浸泡好的吸附剂搅匀，随即将此悬浮液连续倾入柱中，待其自然沉降至柱高的1/4-1/3时打开柱下端口，让溶剂慢慢流出，使柱上端悬浮液徐徐下降至需要的高度。 这种装柱法对各种基质都适用。层析柱中基质应合乎填装均匀、松紧一致和没有气泡的标准。 （4）上样和洗脱 上样：用滴管轻轻地把样品溶液加到固定相表面，要尽量避免冲动基质。加入样品液的体积一般应小于床体积的1/2。 洗脱：待样品液的液面流到固定相表面时，用滴管加入洗脱剂，并在柱上端与装有洗脱剂的贮液瓶连接开始冼脱。同时在柱下端与部分收集器接通，立即进行分级收集(按体积或时间分管收集)。 理想的洗脱