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- 2019-08-27 发布于浙江
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重点透析 剖析考点 拓展深化 1.植物体细胞杂交与动物细胞融合的比较 比较项目 植物体细胞杂交 动物细胞融合 原理 细胞膜的流动性、植物细胞的全能性 细胞膜的流动性 融合前 处理 用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁 用胰蛋白酶或胶原蛋白酶使细胞分散开 诱导融合 的手段 物理法:离心、振动、电激等;化学法:聚乙二醇(PEG)等试剂诱导 除物理法和化学法外,还可用灭活的病毒诱导 结果 获得杂种植株 获得杂种细胞,以产生细胞产品 比较项目 植物体细胞杂交 动物细胞融合 应用 扩展杂交亲本组合范围,培育新品种 主要是制备单克隆抗体 意义 突破 ,打破了生殖隔离,扩展了杂交的亲本组合 相同点 原生质体融合原理相同,原生质体融合的方法相似 远缘杂交不亲和的障碍 2.制备单克隆抗体过程中两次筛选的方法及目的 项目 第一次筛选 第二次筛选 筛选 原因 诱导融合后得到多种杂交细胞,另外还有未融合的细胞 由于小鼠在生活中还受到其他抗原的刺激,所以经选择性培养获得的杂交瘤细胞中有能产生其他抗体的细胞 筛选 方法 用特定的选择培养基筛选:未融合的细胞和同种细胞融合后形成的细胞(“BB”细胞、“瘤瘤”细胞)都会死亡,只有融合的杂交瘤细胞(“B瘤”细胞)才能生长 对经选择性培养的杂交瘤细胞进行克隆化培养和抗体检测,经多次筛选
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