地中海贫血实验室检测应用和临床.pptVIP

* * * * * β地贫复合α地贫示例 β地贫复合α地贫示例 基因诊断方法 Gap-PCR技术，缺失型α-地中海贫血基因检测的首选方法 PCR-探针法(RDB)技术，β-地中海贫血突变基因检测、非缺失型α-地中海贫血突变基因检测的首选方法 MLPA (缺失型α、β分子诊断技术） DHPLC（β地中海贫血突变分析 ） DNA序列测定法（direct sequencing,DS）基因突变检测方法的金标准 高分辨熔解曲线分析系统（HRM或HRMA）:DNA序列突变的检测 主要内容 地中海贫血的遗传学基础 地中海贫血的实验室检测及应用 少见型地中海贫血应用范例 技术服务简介 少见型地贫基因检测指征及流程 示例 一：β地贫的基因诊断（基因测序） 试剂盒检测范围只包括17个β基因点突变，不能 检测少见或罕见的点突变，当检测到阴性时，应 结合HbA2值综合判断。 β地贫的基因诊断 (基因测序） 7195测序结果： 在nt397处出现双峰，G＞A，对应于CD37(TGG＞TAG)，已知文献报道与β-地贫有关。 示例一中β地贫的基因诊断 (基因测序） 示例二：β地贫的基因诊断（基因测序） 2015年11月深圳市 医院， 1 孕妇遗传咨询 父亲 41-42M杂合子 母亲 未检出17种β突变 先证者 （？岁）夫妻俩第一个孩子 检出 41-42M杂合子 但每月需定期输血！ 母亲可能 存在试剂盒检测范围外的突变，先证者、母亲均进行β测序 母亲：CD8-9(+G)突变，已知文献报道与β-地贫有关 先证者： CD8-9(+G)和CD41-42（ -TCTT ）突变 胎儿：未检出β突变（测序结果有效范围：β珠蛋白基因-90至IVS-2-100、IVS-2-500至3，Poly A部分，包含了?地中海贫血预防控制操作指南?中报道的46种中国南方人群β-地中海贫血突变位点及在此区域内的未知突变位点。） 示例二中先证者测序图 示例二中先证者测序图 示例三：β地贫基因检测（缺失型β ） 父亲： --SEA /αα 27-28M/27-28M 母亲： --SEA /αα βN/ βN 胎儿(脐血）： αα /αα βN/ βN 小孩未遗传到父亲的27-28M位点突变，不符合遗传规律 父亲是否有缺失β（无筛查指标） 示例三：β地贫基因检测（缺失型β ） 示例四：少见α缺失 女，39岁，福建永泰人，汉族，2015年4月 进行孕期检查。查体：贫血面容。HGB 96 g／L、 (MCV)52.4 fl、(MCH)15.2 Pg、Hb A2 1.5％， 常规地贫基因检测检出东南亚型α地贫缺失片段 (--SEA/--SEA)，提示怀疑存在其他缺失片段。 确认基因型：-α27.6/--SEA 问题一：MCV低一定是地贫吗 问题二：血红蛋白异常一定是地贫吗 问题三 问题四 问题五：什么情况下需要作地贫的产前诊断 双方为同一种地贫携带者 怀孕或分娩过巴氏水肿胎 分娩过重度β地贫患儿 夫妇双方之一为α地贫基因携带者，另一方为β合并α地贫基因携带者 主要内容 地中海贫血的遗传学基础 地中海贫血的实验室检测及应用 少见型地中海贫血应用范例 技术服务简介 少见型地中海贫血基因检测服务（一）益生堂 α缺失型地贫： -α2.4 、-α27.6 、 -α21.9 、HKαα等 香港型缺失HKαα检测示例 少见型地中海贫血基因检测服务（二）益生堂 α点突变（测序法） α1: CD74 (GACCAC)、CD78 (-C) CD118（+TCA) α2: CD13 （GCCTCC)、CD30(-GAG) 、 CD31 (AGGAAG)、 CD43/44(-C) 、 CD49(-GC)、 CD59(GGCGAC) 少见型地中海贫血基因检测服务（三）益生堂 少见型地中海贫血基因检测服务（四）益生堂 缺失β地贫 中国型（chinese） 东南亚型（S.E.Asian） 中国台湾型（Taiwanese） 深圳益生堂生物企业有限公司 谢 谢 * * * * Hb Bart’s 胎儿水肿综合征 基因型：四个α-珠蛋白基因缺失或突变 表示为：- -/- - 临床表现： α链不能合成，γ链聚合成 Hb Bart’s (γ4)，氧亲和力高，造成 组织缺氧坏死，导致早产、死胎，个别能活到足月，也会于出生 几小时内死亡。 胎儿有苍白、水肿、肝脾肿大，胸腹腔积液，大胎盘。孕妇容 易合