第二章紫外-可见分光光度法(Ultraviolet-Visible知识讲稿.ppt

第二章　紫外-可见分光光度法 　（Ultraviolet-Visible Spectrophotometry） 　　　　 紫外-可见分子吸收光谱法 （Ultraviolet-Visible Molecular Absorption Spectrometry） ;?2.1 分光光度分析法发展简史 1729年，Bouguer首先发现溶液对光的吸 收与液层厚度之间的关系。 1760年 ，Lambert就此基本定律进行了数 学运算，确定了相应的关系式。 1833年，Brewster在提取叶绿素及胡萝卜 素的研究中，注意到有机化合物的吸收光谱。; 随着对光度分析方法的不断研究和深 入，人们对分析方法的灵敏度和选择性也提 出了更高的要求。 在经典光度法的基础上，又发展了双波 长分光光度法、动力学分光光度法等，使光 度分析的内容和应用范围进一步扩大。 近年来，随着有机试剂的迅猛发展，使 大量的有机试剂应用到分析测试领域，灵敏 度、选择性得到不断提高。 ;　　 最初，比色测定是在比色管中进行的。 19世纪末，开始使用带滤光片的目视比 色计。 20世纪30年代，光电比色计和分光光度 计才被引入实验室。 ;　　 20世纪初期的分光光度计多为单光束手 控型。 20世纪60年代，双光束自动记录光度计 问世。 20世纪70年代开始，微处理机控制的分 光光度计不断出现。双波长分光光度计迅速 发展和商品化。 ;?2.2 分子吸收光谱概述 1．分子吸收光谱产生的本质 　　在分子中，除了原子的核能En，质心在 空间的平动能Et外，还有电子运动能Ee，原 子之间的相对振动能Ev，以及分子转动能Er 等。 　　分子的总能量可写为： E=En + Et + Ee+ Ev+ Er; 由于En在一般化学实验条件下不发生变 化，分子的平动能Et又比较小，因此当分子 能级发生跃迁时，能量的改变为： ?E=?Ee + ?Er +?Ev ; ? E（总）= ? Ee + ? Ev + ? Er　　　 　　　 ? 　? ? 1~20eV 0.05~1eV 0.05eV 　　　　　　　　? 　 ? 　 ? 　　　 相当于紫外- 相当于红 相当于红外光 　　　 可见光能量 外光能量 甚至微波的能量 ; 电子能级跃迁时伴随振动能级和转动能 级的跃迁，因此电子光谱（也称：紫外-可见 吸收光谱），得到的也是由许多谱线聚集而 成的谱带。 ;（1）紫外-可见吸收光谱产生的本质： 紫外-可见吸收光谱产生的本质是由物质 分子中价电子的能级跃迁所产生的。 ;（2）紫外-可见光谱区域范围： 紫外-可见光谱区域范围：10~400nm称为 紫外区，400~780nm为可见光区。 10~200nm称为远紫外区，200~400nm称为 近紫外区。 　　　 ;玻璃器皿及有关光学元件不适合作紫外分 析之用，是由于玻璃对波长小于300nm的电 磁波产生强烈吸收的缘故。所以，作紫外分 析时，一般采用石英制件。;2. 紫外-可见吸收光谱中价电子跃迁的类型 在有机物中，有几种不同的价电子。 以甲醛为例： 例：H-C=O： (a) 单键?电子; (b) 双键?电子; H 　　　(c)未成对的独对(孤)电子－ n电子。; （1）根据分子轨道理论，此三种电子的能级 高低次序是：??n?*?*。 （2）共有六种跃迁类型：?→?*、?→?*、?→?*、n→?*、n→?*和?→?*。 ; 其中?→?*、?→?*、?→?*三种跃迁需要 能量较大，吸收峰小于200nm，位于真空紫 外区。 而n→?*、n→?*和?→?*三种跃迁需要能 量相对较小，吸收峰位于近紫外区甚至可见 区，对于紫外-可见分析具有实用意义。 ; n→?*、?→?*跃迁区别： n→?*（?，10~ 100L/mol·cm）跃迁产生的 吸收峰强度低于?→?*（?，104L/ mol·cm）；