第七章-原核基因表达调控培训课件.pptVIP

诱导物的加入和去除对lac mRNA的影响 诱导物的加入和去除对半乳糖苷酶的影响 乳糖对lac操纵子的影响 3、阻遏物lacI基因产物及功能 mRNA 阻遏蛋白 I DNA Z Y A O P pol 阻遏基因 弱启动子控制的组成型合成 4、葡萄糖对lac操纵子的影响 代谢物阻遏效应 研究认为葡萄糖的某些降解产物抑制lac mRNA的合成，这种效应称之为代谢物阻遏效应. （四）lac操纵子中的其他问题 （一）A基因及其生理功能 β-半乳糖苷酶 透过酶 乙酰基转移酶 乙酰化的半乳糖苷降低对细胞的危害 （二）lac基因产物数量上的比较 Z、Y、A三个基因产物的拷贝数比例为1：0.5：0.2 1、Lac mRNA可能在翻译过程中的核糖体相脱离，从而终止蛋白质链的翻译。 原因：在翻译水平上的调节 2、Lac mRNA分子内部，A基因比Z基因更易受内切酶作用发生降解，故Z基因的完整拷贝数要比A基因多。 原因：在翻译水平上的调节 降解 乳糖操纵子的调控模型 乳糖操纵子的组成：大肠杆菌乳糖操纵子含 Z、Y、A 三个结构基因，分别编码半乳糖苷酶、透酶和半乳糖苷乙酰转移酶，此外还有一个操纵序列 O，一个启动子 P 和一个调节基因I。 阻遏蛋白的负性调节：没有乳糖存在时，I 基因编码的阻遏蛋白结合于操纵序列 O 处，乳糖操纵子处于阻遏状态，不能合成分解乳糖的三种酶；有乳糖存在时，乳糖作为诱导物诱导阻遏蛋白变构，不能结合于操纵序列，乳糖操纵子被诱导开放合成分解乳糖的三种酶。所以，乳糖操纵子的这种调控机制为可诱导的负调控。 乳糖操纵子的调控模型 CAP 的正性调节：在启动子上游有 CAP 结合位点，当大肠杆菌从以葡萄糖为碳源的环境转变为以乳糖为碳源的环境时，cAMP 浓度升高，与 CAP 结合，使 CAP 发生变构，CAP 结合于乳糖操纵子启动序列附近的 CAP 结合位点，激活 RNA 聚合酶活性，促进结构基因转录，调节蛋白结合于操纵子后促进结构基因的转录，对乳糖操纵子实行正调控，加速合成分解乳糖的三种酶。 协调调节：乳糖操纵子中的 I 基因编码的阻遏蛋白的负调控与 CAP 的正调控两种机制，互相协调、互相制约。 色氨酸操纵子与负控阻遏系统 (4)σ因子参与大肠杆菌基因表达调控 存在6种σ因子，其中σ70是调控最基本的生理功能如碳代谢、生物合成等基因的转录所必须的。?除参与氮代谢的σ54外，其它5种σ因子在结构上具有同源性，所以统称σ70家族。 大肠杆菌中的各种σ因子比较 σ因子 编码基因 主要功能 σ70 rpoD 参与对数生长期和大多数碳代谢过程基因的调控 σ54 rpoN 参与多数氮源利用基因的调控 σ38 rpoH 分裂间期特异基因的表达调控 σ32 rpoS 热休克基因的表达调控 σ28 rpoF 鞭毛趋化相关基因的表达调控 σ24 rpoE 过度热休克基因的表达调控 所有σ因子都含有4个保守区，其中第2个和第4个保守区参与结合启动区DNA，第2个保守区的另一部分还参与双链DNA解开成单链的过程。 不同σ因子结合DNA的序列及结合顺序不完全相同。 2、原核基因调控的主要特点 通过特殊代谢物调节基因的活性主要有可诱导和可阻遏两大类 （1）可诱导调节： （2）可阻遏调节： 规律：可诱导基因总是一些编码糖和氨基酸分解代谢蛋白的基因。而可阻遏基因是一些合成各种细胞代谢过程中所必须的小分子物质（如氨基酸、嘌呤和嘧啶等）的基因。 3、弱化子对基因活性的影响 属于这种调节方式的有大肠杆菌色氨酸操纵子、苯丙氨酸操纵子、苏氨酸操纵子、异亮氨酸操纵子等。 起信号作用的是有特殊负载的氨基酰-tRNA的浓度，在色氨酸操纵子中就是色氨酰-tRNA的浓度。 当操纵子被阻遏，RNA合成被终止时，起终止转录信号作用的一段核苷酸被称为弱化子。 有葡萄糖存在的情况下，即使在细菌培养基中加入乳糖、半乳糖、阿拉伯糖或麦芽糖等诱导物，与其相对应的操纵子也不会启动，产生出代谢这些糖的酶来，这种现象称为葡萄糖效应或称为降解物抑制作用。 4、降解物对基因活性的调节 5、细菌的应急反应 细菌在紧急状况，如氨基酸全面匮乏时。会产生应急反应，包括生产各种RNA、糖、脂肪和蛋白质在内的几乎全部生物化学反应过程均被停止。实施这一应急反应的信号是鸟苷四磷酸（ppGpp）和鸟苷五磷酸（pppGpp）。产生这两种物质的诱导物是空载tRNA。 氨基酸饥饿时，细胞中存在大量不带氨基酸的tRNA，这种空载tRNA会激活焦磷酸转移酶，使ppGpp大量合成。ppGpp会关闭许多基因，同时也会打开一些合成氨基酸的基因，以应付紧急状况。 ppGpp与pppGpp的作用范围十分广泛，不只影响一个或几个操纵子，影响一大批操纵子，是超级调控因子。 二、乳糖操纵子(lac operon) 乳糖操纵