感染性疾病的实验诊断(2015-7-29).pptVIP

感染性疾病的实验诊断 浙江大学医学院附属第一医院 传染病诊治国家重点实验室 杨 青 不适当初始抗菌治疗将导致病死率显著提高 A post-antibiotic era is instead a very real possibility for the 21st century-----WHO 提高抗感染水平的关键-正确的诊断 感染的诊断 感染类型，感染部位 病原体的诊断 获得确切的病原体 耐药性的诊断 耐药菌的种类 耐药机制明确 感染性疾病的实验室诊断 体外药敏试验 病例1 患者男性，33岁，有18年乙肝病史 6.27患者无明显诱因地出现头痛伴发热，体温最高达38.7度，伴全身肌肉酸痛，乏力，胃纳差，恶心 6.30在杭州某医院就诊，血常规：白细胞 7.4×10E9/L，淋巴细胞3.6×10E9/L，超敏CRP 10mg/l，拟诊为“脑炎”，建议患者住院行腰穿，患者拒绝 7.1来我院就诊，头颅CT未见异常 血培养结果成为诊断的关键 7.1血培养：马耳他布鲁菌 采血指徵 发热（38C）或低温（36C）、寒战、呼吸快 白细胞增多（计数大于10，000109/L，特别有“核左移” 未成熟的或杆状核）、CRP升高 皮肤粘膜出血 血压降低、昏迷、多器官衰竭 血液病：粒细胞减少（成熟的多核白细胞1000109/L）、血小板减少 血培养遇到的问题 血培养阳性率偏低 血培养污染 报告时间较长 (48 – 72 h) 提高血培养阳性率，关键在临床； 改善血培养报告质量，关键在实验室 影响血培养阳性的关键因素 采血时机 采血次数 接种血液数量 皮肤消毒 … 为什么要采双瓶双侧 我院数据 每瓶要保证足够的血量 J Microbiol Immunol Infect, 2013, 46(1): 48-52 浙大一院血培养送检情况 日期 样本号 姓名 培养结果20140402BAA230 鲍加祥 培养7天无菌生长20140403BAA214 鲍加祥 培养7天无菌生长20140404BAA231 鲍加祥 培养7天无菌生长20140405BAA229 鲍加祥 培养7天无菌生长20140406BAA214 鲍加祥 培养7天无菌生长20140407BAA209 鲍加祥 培养7天无菌生长20140408BAA214 鲍加祥 培养7天无菌生长20140409BAA206 鲍加祥 培养7天无菌生长 病例2 美平 美平 + 替考 美平 + 替考 + 米卡芬净 特治星 + 万古 + 米卡芬净 泰能 + 替加+万古 + 米卡芬净 7.30血培养阴性 7.31血培养阴性 8.1血培养阴性 8.4血培养阴性 8.6送检血培养,4.5H报警阳性(下午6点） 8.7早上血培养报警阳性，涂片阴性杆菌 立即抽取血培养液离心取菌液上机鉴定药敏 下午3点鉴定结果大肠埃希菌 下午4点药敏结果IMP MIC≥16ug/ml,TGC MIC 0.38ug/ml，其余抗菌药物均耐药。 PCR证实产NDM-1 初步染色，转种 培养 染色报告 鉴定/药敏试验 血标本 阳性报警 完整报告 血培养三级报告－缩短TAT 鉴定 第一天 第二天 第三天 标本质量评估－痰涂片 痰标本的采集方法 自然咳痰 呼吸道分泌物培养前一定要做涂片！！ 鳞状上皮细胞、细菌 合格标准只有一个：鳞状上皮细胞＜10 病例2 患者胡某某，女，52，因“发热半月余，胸痛1周”入院（2013.11.11） 简要病史：患者半月前出现发热，最高体温40.0℃，1周前感胸痛，深呼吸及咳嗽时较明显，2天前至当地医院就诊，予抗感染治疗，未见明显好转。 既往史有溶血性贫血、高血压病史，长期不规则服用激素 2013.11.11肺CT：两肺多发结节灶 2013.11.14肺增强CT：两肺多发结节伴厚壁空洞，两侧少量胸腔积液，曲霉菌感染首先考虑，恶性病变待排，必要时穿刺活检 痰涂片（2013.11.13） 涂片报告提示奴卡菌 尿培养流程 护理人员 执行医嘱 患者留取标本 实验室 按规程操作 发出报告 临床评价 医生医嘱 大量假阳性 少量假阴性 与临床符合率太低 阴性菌105CFU/ml，阳性菌104CFU/ml 脓液或创面分泌物 标本应区分浅表、深部或手术切口 皮肤消毒非常关键 开放性损伤，无菌生理盐水擦洗病灶表面 未溃破的脓肿宜用碘酒、酒精消毒皮肤 取材部位最好为损伤基底部或病变有进展的边缘，不可