第15章定量分析中的分离与富集方法.ppt

15-4 纸色谱与薄层色谱法（1） 均属于液相色谱法，固定相呈平板状，故称平板色谱。 固定相 纸色谱：滤纸上的吸附少量水（极性）或弱/非极性溶剂，属于分配色谱； 薄层色谱：SiO2、Al2O3等固体吸附剂，属于吸附色谱 流动相：混合溶剂（水+有机溶剂+酸碱性溶剂） 流动相驱动力：毛细作用 15-4 纸色谱与薄层色谱法（2） 基本操作及定性、定量基础 准备工作：滤纸或薄层板；层析液；适当浓度的试样 点样 层析 显色（物质自身有颜色可免） 定性：比移值 定量：斑点面积大小或颜色 深浅或截取斑点溶解后测定 比移值R=x/y。分离条件相同时同一物质的R相同，反之不成立。 选择展开剂的三角形法示意图 活泼 吸 附 剂 不活泼 极性 非极性 展 开 剂 非极性 极性 被 分 离 物 质 15-4 纸色谱与薄层色谱法（3） 纸色谱和薄层色谱的特点 仪器自动化程度、分辨率及重现性不及GC、HPLC 一次性的固定相，对样品预处理要求不高；展开剂用量少，经济环保 固定相，特别是流动相选择范围宽，有利用不同性质化合物的分离，对待分离组分没有太多限制； 具有多路柱效应，可同时平行分离多个样品； 试样全部组分均停留在平面上，不会造成检测失落，对未知试样的分析很有利，可随时对谱图测定以获得最佳结果，直观性、可比性极强 现代化薄层色谱采用高效薄层板，且在每步操作均有相应的仪器代替手工，使得定量分析的准确度和重现性大大提高 设备简单、操作方便，是一般实验室必不可少的分离分析手段。 纸色谱法分离氨基蒽醌试样中的各种异构体 1,7-氨基蒽醌 1,6-氨基蒽醌 1,8-氨基蒽醌 1-氨基蒽醌 硝基蒽醌 溶剂前沿 原点 样品：氨基蒽醌 固定相：附着于滤纸纤维素上的?-溴代萘 展开剂：吡啶：水（1:1） 双向纸色谱法分离氨基酸 例：?氨基酸混合液点在15×15 cm滤纸边2 cm处，风干，展开剂用CH3OH-H2O-吡啶（20:5:1），当溶剂移动至14 cm处，取出风干（第一次展开）?将滤纸折成筒状，使斑点处于下方，再用叔丁醇-甲基乙基酮-H2O-二乙胺（10:10:5:1）展开14 cm，取出风干（第二次展开）?显色：茚三酮-4-乙-2-甲氮苯-冰HAc ? ? ? ? ? ? x x ? 选用不同的展开剂双向展开，可大大提高分离效率，特别适合复杂试样的分离。 薄层色谱法分析毒品 Unknown from case Known Methamphtamine Known Heroin Known Cocaine 薄层色谱法测定3,4-苯并芘 富集：环己酮或石油醚提取，脱水后浓缩至0.1 mL 层析分离：制板、点样、展开 测定：截取-乙醚洗脱-蒸干-浓H2SO4溶解；荧光法测定 薄层色谱法用于中草药提取成分的分析 连翘提取液的薄层色谱 第15章 分析化学中分离与富集方法Separation and Enrichment Methods in Quantitative Analysis 定量分析过程 取样 溶样 测定 计算 消除干扰 掩蔽 分离（富集） 方法 步骤 数据处理 结果 试样组成复杂，基体干扰严重时，通常需先分离后测定 分离的目的 对分离的基本要求 干扰组分应减小至不再干扰被测组分的测定 被测组分在分离过程中的损失要小到可以不计 回收率 —消除干扰、富集微量待测组分 主要组分 RA99.9% 1%左右 RA99% 微量组分 RA95%或更低 分离因数 固液分离 *沉淀分离 *离子交换分离 氢氧化物：NaOH、NH3 硫化物：H2S 有机沉淀剂：H2C2O4，丁二酮肟 气液分离：挥发和蒸馏 克氏定氮法，Cl2预氧化I-法 液液分离 螯合物萃取 离子缔合物萃取 三元络合物萃取 支撑型液膜 乳状液型液膜 生物膜 *萃取分离 液膜分离 其他分离方法：萃淋树脂、螯合树脂、浮选、*色谱分离法 分离分析法：气相色谱法，液相色谱法、电泳分析法 分 离 方 法 阳离子交换树脂 阴离子交换树脂 螯合树脂 15-1 沉淀分离法（1） 无机沉淀剂分离法 氢氧化物沉淀 硫化物沉淀 其它沉淀剂 有机沉淀剂分离法 螯合物沉淀 缔合物沉淀 三元配合物沉淀 容易共沉淀，选择性不高 应首先沉淀微量组分 种类多，选择性好 晶型好，可灼烧除去 无机沉淀剂分离法（1） 氢氧化物沉淀（1） 缓冲液 难溶化合物悬浮液 控制pH实现分离 难溶物化合物悬浮液 人为控制 无机沉淀剂分离法（2） 氢氧化物沉淀（2） OH-： NH3?H2O： 硫化物沉淀 其它沉淀剂 分离两性（Zn、Pb、Sn、Al）与非两性元素 分离蛋白质（调pH至等电点） 分离高价金属离子（Th4+、Al3+、Fe3+）与易生成氨络合物的金属（Cu、Co、Ni、Zn、Cd、Hg、Ag） 有机沉淀剂分离法