第三章酶的提取分离与纯化教学课件.ppt

两种电泳液 高离子强度电泳液： 141.1克甘氨酸，30克Tris， →定容1000ml→稀释20倍 →调pH8.3 低离子强度电泳液： 2克甘氨酸，5.2克Tris， →定容1000ml→稀释10倍 →调pH8.7 6 、停止电泳与卸板 1）停止电泳 当指示剂迁移到胶板下端的1cm左右时，停止电泳。 2）卸板（剥胶） 7、染色与结果记录 1）染色：（实验指导） 2）结果记录： 绘图与测量迁移率： 迁移率（Rf）=酶带移动距离/指示剂移动距离 照相：透光照相 光密度扫描：用光密度计将酶谱以光密度曲线和光密度值形式记录下来，配合计算机，可作定量分析。 * 高山求鱼，迎风散水 * 甲苯防治微生物的污染,颗粒大小以0.1mm为宜 * Tris： * PEG：防止酚类化合物的作用导致酶的失活。 * 血清蛋白质：α1 α2 βγ * 5）几个概念 酶的等电点（pI）： 在溶液中，使酶分子所带的正电荷恰好等于负电荷时的pH值。 离子强度（I）：I=1/2?scz2 s：离子种类数；z：离子价数；c：离子浓度（M） 单单价电解质的离子强度：2c 单双价电解质的离子强度：3c 双双价电解质的离子强度