第一组蛋白质立体结构的测定.pptVIP

第一組蛋白質立體結構的測定 NMR X-Ray CD NMR(nuclear magnetic resonance ) 核磁共振 前言 簡介 約15,000 種蛋白質的三維結構已被解出，80%是用X-ray 解出，20%用NMR 解出 NMR 解出三維結構時不需要長單晶(single crystal)，只要溶在水溶液當中即可，比較符合生物巨分子的生理狀態。 NMR產生訊號的原理 核磁共振儀的射頻器(transmitter)打了一個脈衝(pulse)，將此淨磁化量偏移z 軸，此偏移的磁化量就沿著磁場方向(z 軸)做進動(precession)。造成此磁化量形成陀螺的軌跡，如下頁圖所示。此磁化量的軌跡，會引導一個振盪電流而被記錄下來。 2 .從NMR的peak area 和高度比可知特定原子的數量和原子鍵結的環境。 NMR的光譜分析 一維：H太多 → 訊號複雜 → 難以分析 二維：NOE效應 →可得知原子間的距離 三維：NOE效應+TOCSY技術+NOESY技術  → 旋性、凡得瓦半徑、鍵角  → 輸入computer run出可能的三度結構 〈補充〉NOE 效應 (Nuclear Overhouser Effect) NMR 之所以能解出蛋白質分子在水溶液的三維結構，主要的就是要靠NOE 效應。