基因工程课件22章.pptVIP

* * 第三节???????? 大肠杆菌分子克隆载体 一、E.coli克隆载体的种类 1. 质粒载体—复制起点来自一些天然质粒。 2. 噬菌体载体—λ，P1和M13、fd载体，复制起点来自噬菌体。 3. COS质粒载体—质粒载体中插入λcos片段，以利于体外包装 4.噬粒载体（phagemid）—有质粒和M13、fd的复制起点，以质粒或噬菌体方式复制。 二、质粒与质粒载体 1. E．coli的质粒种类 1) colE1因子（大肠杆菌素因子）—多数不能进行接合转移DNA，属高拷贝松弛型。 2) R因子（抗药性因子） 可接合转移DNA，属低拷贝 严紧型， 质粒较大，操作不便 3) F因子（性因子） 2.质粒的特点 1) 质粒DNA复制与染色体复制无关 2) 质粒DNA以超螺旋形式存在 3) 质粒DNA可以接合转移 4) 质粒的不相容性和不相容群 5) 质粒DNA的消除—化学和物理法(吖啶染料，EtBr，高温等) 6) 质粒的整合—F因子又可整合到E.coli染色体中