生化3第3章核酸化学.pptVIP

 （三）小片段核苷酸的顺序测定 1、按序降解法 第六节核酸研究的常用技术 一.DNA的凝胶电泳 （一）琼脂糖凝胶电泳 1.琼脂糖凝胶浓度及选择 2.琼脂糖凝胶电泳的分辨率 3.琼脂糖凝胶电泳的用途(分离,测量,回收,印迹) （二）PAGE电泳 1. PAGE浓度及选择 2. PAGE电泳的分辨率 3.PAGE电泳的用途 （三）影响凝胶电泳Rf值的因素 1.分子大小 2.分子构象 3.凝胶浓度 4.电流电压 5.温度 第三节 DNA的分子结构 一、DNA的一级结构及测定 1.加减法 2.双脱氧法 3.化学修饰法 二.DNA的二级结构 2.0 nm 小沟 大沟 双螺旋DNA的结构参数 32.7o 36o 38o -60o 0.255 0.34 0.33 0.27 11 10 9.3 12 2.8 3.4 3.1 4.5 2.0 2.3 1.92 1.8 右75%Na+ 右92%Na + 右66%Li + 左 人工合成 A－DNA B－DNA C- DNA z－DNA 碱基旋转角度 碱基对间垂直距离（nm） 每转碱基对数目 螺距（nm） 螺旋直径（nm） 旋转方向 结晶状态 类型 H-DNA 三、DNA的三级结构 DNA双螺旋的进一步扭曲构成三级结构，负超螺旋 原核 双链环状DNA（dcDNA） 病毒