蛋白质合成及转运生科.ppt

一、蛋白质的生物合成： ● 合成场所：核糖体. ● 原料：氨基酸、tRNA 、mRNA 、rRNA 其他蛋白因子、ATP、GTP. 粗面内质网 （一）蛋白质合成的分子基础： 1、 mRNA是蛋白质合成的模板： ● 含有三联密码子. ● 阅读方向5’ → 3’. ● 有起始密码AUG和终止密码UAA、UAG、UGA. ● 3’端：真核生物有PolyA尾巴. ● 5’端：决定起始密码的选择. 2、tRNA转运活化的氨基酸到模板上： ● 每种氨基酸都至少有一种tRNA负责转运. ● 书写方式：tRNAPhe、 tRNASer ● 通常一种氨基酸具有几种tRNA. tRNA分子的识别位点包括： ● 3’CCA-OH氨基酸接受位点. ● 识别氨酰-tRNA合成酶位点. ● 核糖体识别位点. ● 反密码子结合位点. Cys* 3、核糖体是蛋白质合成的工厂. 2、特定的氨酰tRNA合成酶识别： ● 特定的氨基酸. ● 与氨基酸对应的特定的tRNA. 3、氨酰tRNA合成酶的校正功能： ● 水解非正确组合的氨基酸和tRNA. ● 异亮氨酰–tRNAIle ● 缬氨酰–tRNAVal ● 缬氨酰–tRNAIle则被水解：缬氨酸+tRNAIle 4、一个特殊的tRNA启动蛋白的合成： ● 所有蛋白质的翻译都起始于甲硫氨酸（Met）的参与. ● tRNAMet：携带Met掺入蛋白内部. ● tRNAiMet ：携带起始的Met掺入. ● 由同一种tRNA合成酶合成：起始因子识别tRNAiMet 延伸因子识别tRNAMet 5、翻译起始于mRNA与核糖体的结合： ● 真核生物mRNA分子的5’端有核糖体进入部位: 帽子结构帮助识别mRNA分子与核糖体的结合位点. 核糖体沿着 mRNA分子5’ → 3’扫描至起始密码AUG. ● 真核生物最靠近5’端的AUG序列通常就是起始密码. 6、蛋白因子帮助合成的起始： ● 蛋白质合成的起始、延伸和终止的每一个阶段，都涉及到一组不同的蛋白质因子的帮助. ● 原核生物（大肠杆菌）： 三个起始因子（initiation factor）：IF1、IF2、IF3 真核生物：更多种的起始因子帮助. A：新进来的氨基酸结合位点. P：肽链结合位点. E：出口（大部分在大亚基上）. 8、翻译的终止（terminate） ● 没有识别终止密码子UAA、UAG、UGA的tRNA. ● 有核糖体释放因子的协助. 多核糖体（polysome）： 多核糖体与核糖体循环： 9、蛋白质合成的抑制剂：了解. 抗菌素（antibiotics） 毒素 抗代谢物 干扰素 （1）抗菌素 链霉素、卡那霉素、新霉素 主要抑制G-菌蛋白质合成三个阶段： ① 起始复合物形成—使氨基酰tRNA从复合物脱落； ② 肽链延伸阶段—使氨基酰tRNA与mRNA错配； ③ 终止阶段—阻碍终止因子与核蛋白体结合，已合成的多肽链无法释放，抑制70S核糖体的解离. 四环素（土霉素、金霉素） ①作用于细菌30S小亚基，抑制起始复合物形成； ②抑制氨酰tRNA进入核糖体A位，阻滞肽链延伸； ③影响终止因子与核糖体的结合 四环素类抗生素对真核细胞核糖体也有抑制. 但不能通过真核生物细胞膜. 对70S核糖体的敏感性更高. 氯霉素——广谱抗生素： ① 与核糖体A位紧密结合，阻碍氨基酰tRNA进入 ② 抑制肽酰转移酶活性，肽链延伸受到影响. （2）毒素： 白喉霉素：催化蛋白发生ADP-核糖基化. 共价修饰使EF-2失活 一条多肽单链，2个二硫键，2个结构域 β结构域与细胞表面受体结合→毒素蛋白水解断裂 二硫键还原，产生A、B两片段： B协助A通过细胞膜，A为蛋白修饰酶 （3）抗代谢物： ● 结构与天然代谢物相似. ● 竞争性抑制代谢中酶/反应. 嘌呤霉素：结构与Tyr-tRNA Tyr相似，进入核糖体A位 连于肽链的C端，形成肽酰嘌呤霉素，容易脱落，肽链 合成提前终止. 嘌呤霉素对原/真核生物翻译过程均有干扰，用于肿瘤 治疗. （4）干扰素（interferon，IFN） ● 病毒感染的宿主细胞产生： 白细胞（α）、成纤维细胞（β）、免疫细胞（γ） ●干扰素结合于细胞膜，活化抗病毒蛋白基因，诱导产生： 蛋白激酶使eIF2磷酸化失活； 2’-5’腺嘌呤寡聚核苷酸合成酶； 2’-5’A激活磷酸二酯酶水解mRNA . 五、蛋白质的运输及翻译后修饰： ●蛋白质定位： ●信号肽假说简图： ●一些真核细胞多肽链上N-端的信号肽的结构： ●分泌蛋白质的合成和胞吐作用： ● 肽链的折叠： ●