生物制品化学规定规程.doc

生物制品化学规定规程 本规程载人的化学检定项目，如采用其他方法测定，其结果与本规程所列应无显着差异。如遇制品质量存在疑问时，其最后判定应以本规程所列方法测定结果为准。 标准液的配制与标定方法参看最新版《中国药典》。 PH值测定（电位法） 1　仪器校准（定位）用标准缓冲溶液 应使用分析纯标准缓冲物质配制。 1.1　0.05mol/L邻苯二甲酸氢钾溶液 称取于115±5℃干燥2～3小时的邻苯二甲酸氢钾（KHC8H4O4）10.12±0.01g，溶于蒸馏水，并稀释至1000ml。 1.20.025mol/L磷酸氢二钠和0.025mol/L磷酸二氢钾混合溶液 分别称取在115±5℃干燥2～3小时的磷酸氢二钠（Na2HPO4）3.53±0.01g和磷酸二氢钾（KH2PO4）3.39±0.01g，溶于预先煮沸过15～30分钟并迅速冷却的蒸馏水中，并稀释至1000ml。 1.30.01mol/L硼砂溶液 称取硼砂（Na2B4O7·10H2O）3.80±0.01g（注意：不能烘！），溶于预先煮沸过15～30分钟并迅速冷却的蒸馏水中，并稀释至1000ml。置聚乙烯塑料瓶中密闭保存。 标准缓冲溶液于0～50℃的标准pH值 温度(℃) 0.05mol/L邻苯二甲酸氢钾 0.025mol/L混合磷酸盐 0.01mol/L硼砂 0 4.01 6.98 9.46 5 4.00 6.95 9.39 10 4.00 6.92 9.33 15 4.00 6.90 9.28 20 4.00 6.88 9.23 25 4.00 6.86 9.18 30 4.01 6.85 9.14 35 4.02 6.84 9.10 40 4.03 6.84 9.07 45 4.04 6.83 9.04 50 4.06 6.83 9.02 2　操作 使用玻璃电极酸度计测定，操作方法按仪器说明书进行。用两种标准缓冲溶液校正或核对，相差不得超过0.05。 固体总量测定 甲、105℃干烤法 1　操作 精确量取一定体积样品于干燥至恒重的扁称量瓶中，置105℃烤箱中烘至恒重。 2　计算 烘干后样品重量 样品固体总量%（g/ml）=　──────────×100 样品ml数 乙、50℃干烤法 1　操作 精确量取1mlA群脑膜炎球菌多糖菌苗半成品原液于已干燥至恒重的称量瓶（2×2.5cm）中，置50℃干燥箱中，干燥至恒重。 2　计算 同105℃干烤法。 半微量定氮法 1　试剂 1.1　硫酸 化学纯，比重1.84。 1.2　消化剂 硫酸铜（CuSO4·5H2O）1份与硫酸钾（K2SO4）10份共同研细混匀即成。 1.3　12.5mol/L氢氧化钠液 取氢氧化钠500g，加蒸馏水至1000ml，摇匀。 1.4　2%硼酸吸收液 硼酸20g加蒸馏水使溶解成1000ml，加混合指标剂10ml，摇匀。 1.5　混合指示剂 0.2%（g/ml）溴甲酚绿酒精溶液5份与0.1%（g/ml）甲基红酒精溶液2份混合配成。 1.6　标准0.01mol/L盐酸或0.005mol/L硫酸溶液。 2　操作 2.1　消化 准确量取一定体积样品（含氮量在1～2mg左右）于凯氏定氮瓶中，加消化剂约0.3g，浓硫酸1.0ml进行消化，至澄明蓝绿色，继续消化约60分钟，同时做空白。 2.2　蒸馏与滴定 取10ml硼酸吸收液于100ml三角瓶内，将凯氏蒸馏器冷凝管末端浸入硼酸吸收液内，将消化好的样品移入凯氏蒸馏器内，用蒸馏水洗定氮瓶3～4次，洗液亦移入蒸馏器内，再加5ml　12.5mol/L氢氧化钠溶液，然后进行蒸馏，待接收液总体积约35～50ml,将冷凝管末端取出液面，让蒸汽冲洗约1分钟，再用少量蒸馏水冲洗冷凝管末端，接收液用标准0.01mol/L盐酸或0.005mol/L硫酸进行滴定，至溶液显著变色。 3　计算 （样品滴定数–　空白滴定数）×标准盐酸mol/L×14 样品总氮含量(mg/ml)──────────────────────── 样品ml数 附注 1.蒸馏前应蒸洗蒸馏器15分钟。 2.蒸汽发生瓶内应加数滴硫酸及甲基红指示剂至呈明显红色。 蛋白质含量测定 甲、钨酸沉淀法 1　试剂 1.110%钨酸钠溶液 取钨酸钠10g，加蒸馏水使溶解成100ml。 1.2　0.33mol/L硫酸溶液 量取化学纯硫酸1.86ml，缓缓注入适量的蒸馏水中，待冷加水稀释至100ml。 1.30.145mol/L氯化钠溶液 取氯化钠9g，加蒸馏水使溶解成1000ml。 2　操作 2.1　钨酸除蛋白质 精确量取样品2ml加蒸馏水14ml，加10%钨酸钠2ml，0.33mol/L硫酸2ml，摇匀，静置30分钟过滤。 2.2　精确量取样品1ml，用0.145mol/L氯化钠溶液准确稀释至每ml含氮量1mg左右。 2.3　精确量取稀释液1ml及除蛋白质