鹿茸多肽治疗骨性关节炎的实验研究.pdf

长春中医药大学2009 届硕士学位论文 中文摘要 中 文 摘 要 目的：探索鹿茸多肽促进骨性关节炎软骨细胞增殖及维持新增殖软骨细胞正常表型 的作用 方法：取24 只新西兰大白兔，雌雄各半，平均分成8组，每组3只。两只按照Hulth [1] 法 稍作改动后制作动物模型，在兔双后膝关节内侧做横向切口，切断内侧副韧带，切 断前交叉韧带，并全部切除内侧半月板；另外1只做假手术，不切断前交叉韧带，也不 切除内侧半月板。每周制作一组模型。从第9周开始，每周处死一组动物，手术截取兔 膝关节，分离培养软骨细胞。由假手术动物双后膝关节分离获得的软骨细胞作为正常对 照组，由模型动物分离获得的软骨细胞分为：模型组、鹿茸多肽低剂量组、鹿茸多肽中 剂量组、鹿茸多肽高剂量组。正常对照组和模型组中加入10%IMDM正常培养液，鹿茸 多肽低、中、高剂量组分别加入6µg/ML鹿茸多肽、12µg/ML鹿茸多肽、24µg/ML鹿茸多 肽，继续培养一定时间。通过MTT法测定软骨细胞增殖、甲苯胺蓝染色鉴定细胞表型、 Ⅱ型胶原免疫组化染色的方法来检验鹿茸多肽促进骨性关节炎软骨细胞增殖及维持新 增殖软骨细胞正常表型的作用。 结果：鹿茸多肽对骨性关节炎软骨细胞增殖没有明显促进作用；鹿茸多肽可以明显 提高骨性关节炎软骨细胞外基质中的糖氨多糖和Ⅱ型胶原含量。 结论：软骨细胞的正常表型表达，是软骨基质保持稳定的基础，软骨细胞功能的异 常是骨性关节炎变化的开始和关键。本研究利用家兔骨性关节炎模型分离获得骨关节炎 软骨细胞，并在骨关节炎软骨细胞中加入不同浓度的鹿茸多肽进行干预。结果表明：鹿 茸多肽对骨性关节炎软骨细胞增殖没有明显促进作用，可能由于某些因素掩盖了鹿茸多 肽对骨性关节炎软骨细胞的促增殖效果，还有待于进一步研究；鹿茸多肽可以明显提高 骨性关节炎软骨细胞外基质中的糖氨多糖和Ⅱ型胶原含量。提示：鹿茸多肽对骨性关节 炎软骨细胞增殖没有明显促进作用，但对维持新增殖软骨细胞正常表型起到正向调节作 用。 关键词 骨性关节炎 鹿茸多肽 软骨细胞 糖氨多糖 Ⅱ型胶原 1 长春中医药大学2009 届硕士学位论文 英文摘要 ABSTRACT Purpose: To study effective function mechanism of Pilose antler peptide on OA Method: Twenty fours New Zealands rabbits, Male and female fifty-fifty, Divide them into 8 set averagely ,3 per set. The animal model of OA was induced by Hulth’s method in animals of experiment group, Another one don’t operation. Make a group of model weekly. From ninth, the cycle begins, we kill a group of rabbit weekly. Make and cultivate the OC, and we divide them into 5 set. Be respectively: control group 、model group 、VAPs6µg/ML group 、VAPs12µg/ML group and VAPs24µg/ML group. Part for add the chemical reagent. At last we pass fixed method to check the results. Result: Velvet antler polypeptides is not bene