粪大肠杆菌检测作业指导书.doc

粪大肠杆菌检测作业指导书 1.试剂及培养基配制 1.1试剂配制 a)溴甲酚紫乙醇溶液：称取1.6g的溴甲酚紫溶于2~3ml乙醇中，然后用蒸馏水定容到100ml。 b)碳酸钠溶液：称取10.6g碳酸钠溶于蒸馏水，并定容到100ml。 1.2培养基的配制 1.2.1乳糖蛋白胨培养液： a)成分：蛋白胨10.0g；牛肉膏3.0g；乳糖5.0g；氯化钠5.0g；溴甲酚紫乙醇溶液1ml；蒸馏水1000ml。 b)制法：将规定量的蛋白胨、牛肉膏、乳糖及氯化钠加热溶解于1000ml蒸馏水中，用碳酸钠溶液调节PH为7.2~7.4。加入1ml溴甲酚紫乙醇溶液，混匀，分装于置有倒管的试管内（10ml左右）。置高压蒸汽灭菌器中，于115℃灭菌20min。 1.2.2EC培养基 a)成分：胰蛋白胨20.0g；乳糖5.0g；胆盐混合物1.5g；磷酸氢二钾4.0g；磷酸二氢钾1.5g；氯化钠5.0g；蒸馏水1000ml。 b)制法：将上述成分加热溶解，分装于内装倒管的试管中。灭菌后PH值应为6.9。此培养基用钱不宜置冰箱，以防检测时出现假阳性。 2.样品采集 2.1样品瓶 应用可耐灭菌处理的广口玻璃瓶或无毒的塑料瓶。灭菌前，把具有玻璃瓶塞得采样瓶用铝箔或厚的牛皮纸包裹，瓶颈系一长绳，在121℃经15min高压灭菌。 2.2水样采集 开瓶塞时，要连同铝箔一起拿开。手执长绳的末端，将采样瓶投入选定点的海水内，采集