提纯菠萝蛋白酶的分子量的鉴定SDSPAGE.pptVIP

实验三 提纯菠萝蛋白酶的分子量的鉴定—SDS一、实验目的 1、学习和掌握电泳（PAGE和SDS）的基本原理及电泳技术。 2、熟练掌握SDS有关试剂配制的技术。 3、了解SDS垂直板电泳法的基本原理及操作技术。 二、实验原理 电泳的概念：带电粒子在电场中向与其自身带相反电荷的电极移动，这种现象称为电泳(electrophoresis，简称EP)。 用电泳技术分离、分析蛋白质、酶、核酸等生物大分子，有较高的分辨率，目前已成为生物科学研究中必不可少的手段之一。 影响电泳的主要因素 影响泳动速度的因素： （1）颗粒性质：一般说来，颗粒带净电荷量越大，或其直径越小，或其形状越接近球形，在电场中的泳动速度就快。反之，则越慢。 （2）电场强度：电场强度越高，带电颗粒的泳动速度越快。反之，则越慢。 （3）pH值：对蛋白质而言，溶液的pH值离其等电点愈远，其带净电荷量就愈大，从而泳动速度就越快。反之，则越慢。 （6）电渗：当支持物不是绝对惰性物质时，常常会有离子基团如羧基、磺酸基、羟基等吸附溶液中的正离子，使靠近支持物的溶液相对带电。在电场作用下，此溶液层会向负极移动。反之，若支持物的离子基团吸附溶液中的负离子，则溶液层会向正极移动。溶液的泳动现象称为电渗。 当颗粒的泳动方向与电渗方向一致时，则加快颗粒的泳动速度；当颗粒的泳动方向与电渗方向相反时则降低颗粒的泳动速度。 聚丙烯酰胺凝