浙江大学生物化学实验甲蛋白质的沉淀和变性反应.pptVIP

蛋白质的沉淀和变性反应 1.1、原理 蛋白质分子在水溶液中，由于其表面形成了水化层和双电层而成为稳定的胶体颗粒，所以蛋白质溶液为一种亲水胶体溶液。 当蛋白质溶液在一定物理化学因素的影响下，蛋白质胶体颗粒的稳定条件被破坏，如失去电荷、脱水，甚至变性，则蛋白质分子将以固态形式从溶液中析出，这个过程称为蛋白质的沉淀反应。 根据其特点的不同可分为可逆沉淀反应和不可逆沉淀反应两种类型。 蛋白质的沉淀和变性反应 1、可逆沉淀反应 蛋白质虽已沉淀析出，但其分子内部结构并未发生显著变化，如果把引起沉淀的因素去除后，沉淀的蛋白质能重新溶于原来的溶剂中，并保持其原有的天然结构和性质。 如蛋白质的盐析作用和等电点沉淀作用 及在低温下，乙醇、丙酮短时间内对蛋白质的沉淀作用。 蛋白质的沉淀和变性反应 蛋白质盐析作用的原理 用大量中性盐使蛋白质从溶液中沉淀析出的过程称为蛋白质的盐析作用。 蛋白质是亲水胶体，蛋白质溶液在高浓度中性盐的影响下，蛋白质分子被中性盐脱去水化层，同时所带的电荷被中和，结果蛋白质的胶体稳定性遭到破坏而沉淀析出。 析出的蛋白质仍保持其天然性质，当降低盐的浓度时，还能溶解，即蛋白质的盐析作用是可逆过程。 蛋白质的沉淀和变性反应 沉淀不同的蛋白质所需中性盐的浓度不同； 沉淀相同的蛋白质，因所用中性盐的不同所需的盐浓度也不同。 所以在不同条件下，用不同浓度的盐类可将各种蛋白质从混合溶液中分别沉淀