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　　 我们明天怎样面对“克隆人”？ * * * * * 显微操作仪 二、细胞核移植与生物克隆 显微操作示意图 细胞核移植技术 细胞核移植与生物克隆 多利羊的克隆实验 严密的实验设计 精心的操作过程 严格的结果检验 细胞核移植与生物克隆 　　到 1980年初，克隆实验已用小鼠取得成功。 　　那么，为什么1990年底多利羊实验成功仍会引起这么大的震动？ 细胞核移植与生物克隆 　　从囊胚细胞核到分化成熟的体细胞核是一个大进步。 　从实验小鼠到羊，也有所不同　　最重要的是时机：1980年初到 1990年末。 细胞核移植与生物克隆 多利羊克隆实验的意义 1）理论意义　　证实分化成熟的动物细胞核仍具全能性。 证实细胞质对胚胎发育分化的决定性。 细胞核移植与生物克隆 80年代初期到九十年代初期 这10年内基因工程用于生产蛋白质—多肽类药物有很大发展,转基因动物——亦已成功,转基因动物提高了蛋白质——肽类药物的产量 　　 英国罗斯林研究所和 PPL 制药公司联合，50 只转基因羊，已传四代。希望用克隆法生产 4000 只基因工程奶羊。 2）实践意义 三、干细胞工程 干细胞（Stem Cell） 　　胚胎干细胞 　　组织干细胞 　　类胚胎干细胞 干细胞工程 细胞替代 　　　治疗角膜病、糖尿病、帕金森病 组织替代 　　　治疗白血病、皮肤、软组织、骨骼等组织病变 器官替代 　　　无排斥反应的器官移植 组织干细胞(成体干细胞) 干细胞工程 浙大干细胞研究 人骨髓间充质干细胞向成软骨样细胞定向诱导分化 诱导后MSCs表达前II型胶原mRNA的电泳图 骨髓间充质干细胞 干细胞工程 浙大干细胞研究 　　医学院王建安教授通过将骨髓干细胞注射给老鼠心肌梗死的坏死部位，使其重新长出肌肉，从而帮助它的心脏有力地跳动。 　　他将骨髓干细胞移植应用于临床，已有近百名心肌梗死、心力衰竭患者接受了髓间充质干细胞移植治疗，取得了一定的疗效。 干细胞工程 胚胎干细胞 　胚胎干细胞获得： 　　从胚胎分离细胞在体外培养和建系 　细胞核移植： 　　通过体细胞核移植到去核的卵细胞，发育成人的胚胎 　　两种方法都要破坏人的胚胎。反对研究人的胚胎干细胞者认为，人的胚胎有生命,应该具有人权，破坏胚胎就是侵犯人权。 类胚胎干细胞（induced pluripotent cells，iPCs）　　 干细胞工程 　　为了打破这种僵局,就迫使人们要探索新的途径,在不触犯伦理、道德和法律的情况下，拿到类似胚胎的所谓全能性的干细胞。 类胚胎干细胞（induced pluripotent cells，iPC）　　 （图片来源：Junying Yu） 2007年日本Yamanaka小组和美国的James Thomson小组分时同时完成了利用人体表皮细胞制造出了类胚胎干细胞。 干细胞工程 干细胞工程 日本的Shinya Yamanaka (长山中伸弥 )小组将Oct3/4，Sox2，c-Myc和 Klf4这四种基因导入来自一位36岁妇女的表皮和一位69岁男性的结缔组织细胞，大约每5000个细胞就能制造一个iPC细胞，这一高效率保证他们在每项实验中都能得到数个细胞系。相关论文在线发表于《细胞》上。 干细胞工程 　　美国的Thomson小组从14种基因中选择了4个基因——OCT3，SOX2，NANOG和LIN28，其中前两个和Yamanaka小组是相同的。　　　 　　Thomson和同事利用的是胎儿皮肤细胞以及一个新生儿的包皮细胞。与Yamanaka小组相比，这项研究需要1万个细胞才能分离出一个iPC细胞系。相关论文在线发表于《科学》上 。 干细胞工程 　　这一技术避开了利用胚胎干细胞的伦理争议。 　　但这项技术存在一些弊端。用于携带4种基因的逆转录病毒载体会导致由iPC细胞发育成的组织中出现肿瘤。 干细胞工程 　　2012年诺贝尔生理学或医学奖 京都大学长山中伸弥：2006年把4个关键基因通过逆转录病毒载体转入小鼠的成纤维细胞，使其变成多功能干细胞。这意味着未成熟的细胞能够发展成所有类型的细胞。 英国发育生物学家约翰-戈登：1962年通过实验把蝌蚪的分化细胞的细胞核移植进入卵母细胞质中，并培育出成体青蛙。这一实验首次证实分化了的细胞基因组是可以逆转变化的。 四、生物克隆的意义 器官移植 人类疾病的动物模型 生物克隆的伦理 1、器官移植 角膜 皮肤 肾 肝 肺 心脏等等 器官移植大量开展需要大