志贺菌血清学检测标准操作规程.doc

志贺菌血清学检测标准操作规程 1．目的 规范志贺菌的血清学检测标准操作规程。 2．原理 用已知的志贺菌诊断血清在载玻片上直接与细菌培养物或菌悬液混合，若出现肉眼可见的特异性凝集块，表示该菌即为志贺菌。 3．试剂 志贺菌诊断血清，生理盐水。 4．质控 福氏志贺ATCC12022阳性；大肠埃希菌ATCC25922阴性。 5.操作步骤 5.1 首先用志贺菌属4种多价血清作玻片凝集，如凝集再进一步作血清定型（用福氏志贺菌1-6型、痢疾志贺菌1-2型、鲍氏志贺菌1-6型及宋氏志贺菌鉴定到种、型）。一般先用福氏志贺菌血清凝集，因我国以B群最为多见，若出现生化反应符合志贺菌，而与4种多价血清不凝集的菌株，应考虑为K抗原存在，将菌液加热到100℃15-30分钟后再进行凝集。 5.2 与各型志贺菌血清不发生凝集，菌落特征与生化反应似痢疾志贺菌，可考虑非典型痢疾血清型，应送专业实验室进行鉴定。 6.结果判断 阴性：试验一侧及对照一侧均为混浊。阳性：对照一侧均为混浊，试验一侧明显凝集。自凝：试验一侧及对照一侧凝集。 7.注意事项 志贺菌菌体表面常有一层K抗原。它能阻抑菌体抗原与抗血清的凝集，从而导致假阴性结果。此时应将菌悬液于100℃中煮沸15-30分钟，以破坏K抗原，然后再做试验。 8.临床意义 主要用于志贺菌属的鉴定。